3.1类新药克利贝特人体药代动力学研究.pdfVIP

3.1 类新药克利贝特人体药代动力学研究 克利贝特是一种苯氧芳酸衍生物类调血脂药物，其降脂作用较安全有效，临 床主治各种类型的高脂血症，由日本住友公司研发，1981 年首次在日本上市， 收载于日本药局方14 版，降血脂作用在同样情况下比氯贝丁脂高10 倍。药动学 口服吸收好，并具有抗血栓作用，是广谱的全身性脂质调节剂。 目前，我国尚无该产品的生产和供应。目的：目前关于克利贝特的人体药代 动力学研究鲜有报道。 本研究拟采用高效液相色谱法(HPLC)建立检测人血浆中克利贝特的方法，应 用于血浆中克利贝特的测定，计算相应的药代动力学参数。采用高效液相色谱法 -串联质谱法(LC-MS/MS)建立检测人尿样中克利贝特的方法，并采用该方法测定 尿样中克利贝特的浓度，从而进行克利贝特尿样药代动力学特征研究。 我们将对中国健康受试者口服克利贝特片后的药代动力学进行研究，旨在为 该药在中国的临床用药提供依据。方法：第一部分建立HPLC 检测血浆中克利贝 特方法并进行方法学验证。 试验步骤：精密量取血浆0.2mL，加入非诺贝特内标（100μ g ·mL-1）20μ L，涡旋混匀。加 0.6mL 乙腈：1mol ·L-1 盐酸=(95:5)沉淀剂，涡旋3 分钟， 将离心机转速调至 16000rmin-1，离心10min，取上清液放置到自动进样器样品 瓶中，进样量为20μ L。 采用DIKMA Inspire C18(150mm×4.6mm I.D)色谱柱，流动相为乙腈-水溶 液（73：27，v/v，含0.4%磷酸）；流速：1.0mL ·min-1；柱温：35°C。第二部 分建立LC-MS/MS 检测尿样中克利贝特方法并进行方法学验证。 试验步骤：精密量取血浆0.2mL，加入非诺贝特内标（2.024μ g ·mL-1）30 μ L，涡旋混匀。加入0.6mL 乙腈：1mol ·L-1 盐酸=(95:5)沉淀剂，涡旋3 分钟， 将离心机转速调至 16000r ·min-1，离心10min，取上清液置到自动进样样品瓶 中，进样量为5μ L。 采用DIKMA Inspire C18(150mm×4.6mm I.D)色谱柱，流动相为甲醇-水溶 液（90：10，v/v，含0.1%甲酸，10mmol/L 醋酸铵）；流速：0.6mL ·min-1；柱 温：35°C。检测离子：克利贝特m/z486.29→175.00,内标非诺贝特：m/z361.10 →233.10；雾化气流速：12L ·min-1；干燥气压力：40psi；毛细管电压：4KV； 干燥器温度：350°C；裂解电压：克利贝特150V，非诺贝特120V；碰撞能：克 利贝特28V，非诺贝特14V。 第三部分血浆中克利贝特单次给药药代动力学及饮食影响研究。共筛选出 36 名健康受试者，分为低剂量组单次服用克利贝特片200m （1 片）、中剂量组 单次服用克利贝特片400m （2 片）和高剂量组单次服用克利贝特片600m （3 片），每组男女各半，各12 人。 健康受试者于早上空腹给药前抽取空白血浆5ml，之后用250ml 的温开水送 服克利贝特，为了防止药物被稀释，服药以后2h 内不能饮水，在给药 0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60 和72h 分别采集静脉血5ml，将采集出来的 血液立刻置于抗凝试管中，将离心机转速调至4000r ·min-1，离心5min，离心 后将所得血浆放在肝素抗凝试管中，于-80°C 保存。中剂量组的 12 名受试者， 采用标准两阶段自身对照试验设计，随机分为I、II 两组，每组男女各半，各6 人。 试验分两个阶段：第一阶段I 组空腹10h 口服克利贝特400m ，II 组在高脂 肪、高卡路里餐后口服克利贝特400m ，在给药前抽取空白血5ml，给药后 0.5,1,2,3,4,5,6,8,12,24,36,48,60 和72h 分别采集静脉血5ml，将采集出来的 血液立刻置于抗凝试管中，将离心机转速调至4000r ·min-1，离心5min，离心 后将所得血浆置肝素抗凝试管中，于-80°C 保存。经过一周清洗期两组交换进 行第二阶段试验，I 组餐后口服克利贝特400mg，II 组空腹口服克利贝特400mg， 其余同第一阶段。 第四部分尿样中克利贝特药代动力学研究。低剂量组健康受试者在进行血浆 中药代动力学研