临床免疫学：第三章 抗原制备技术.pptVIP

一、氨基酸序列的确定 1、已知的蛋白质抗原： 直接从相关的生物信息数据库如NCBI中检索获得其氨基酸序列； 2、部分氨基酸序列已知的蛋白质抗原： 先根据三联密码子原则设计简并引物，再从相对应的cDNA文库中钓取其基因片段，经DNA测序后翻译出完整的序列； 3、序列信息完全不知的新发现蛋白质抗原 ① 蛋白质测序 ②从cDNA文库入手，先获取其DNA编码序列 二、重组蛋白质抗原的制备 氨基酸序列的确定 1．已知的蛋白质抗原 2．部分序列已知 3．完全未知 导入合适的表达宿主（原核表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统） 获得对应的DNA编码序列 构建合适的表达载体 重组蛋白质抗原的表达、鉴定和纯化  第三节 合成肽抗原的制备 基于共同表位和交叉反应原则，合成肽抗原可以 代替天然蛋白质作为免疫原用以制备针对相应天然蛋 白质抗原的特异性抗体。 缺点：免疫原性不强 一、氨基酸序列的确定 二、多肽的合成 一、氨基酸序列的确定 1、肽抗原的长度： 一般为10～20个氨基酸残基，平均15个左右 2、肽抗原的理化特征 ： 线性表位，位于天然蛋白质分子的表面，序列中多含带电氨基酸残基，具有很高的亲水性或具有特定的二级结构