园艺植物组织培养 培养基灭菌 培养基制备-培养基灭菌.pptVIP

园艺技术专业教学资源库 模块三 组培基本操作技术 项目一 培养基制备 1 2 3 CONTENTS 母液配制 培养基种类、成分 培养基配制及灭菌 项目一 培养基制备 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 （一）培养基配置流程 移母液 调PH值 培养基熬制 灭　菌 称取蔗糖、琼脂 扎　口 定　容 分　装 二次定容 接　种 确定配方 园艺植物组织培养 移取母液 大量元素母液 微量元素母液 铁盐母液 有机物母液 三、培养基配制及灭菌 　容　量　瓶 取100ml 取10ml 取10ml 取10ml 要求：一次性移取，不能吸进吸气球里，数量看准，不滴不漏，吹净为度。 园艺植物组织培养 定容 用自来水定容至一升 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 称蔗糖、琼脂 用自来水定容到1升。 取蔗糖25－30g，琼脂7－8g。 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 培养基熬制 1.将定容好的培养液取1/3倒入铝锅中，同时加入称好的蔗糖和琼脂，边煮边搅拌，防止糊底。 2.用旺火煮开，再用文火加热，直至琼脂全部 融化。 3.将容量瓶中剩余的液体一并倒入铝锅中，摇晃使均匀。 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 调PH值 用0.1MNaOH或HCl调PH值为5.8。 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 分装 趁热分装，100ml的三角瓶约装入30－40ml, 35瓶/L。 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 扎口 封口松紧适宜，系活 扣，便于接种操作; 培养基应及时灭菌，防止变质。 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 （二）培养基灭菌 1.在培养基灭菌的同时，蒸馏水、滤纸及一些用具如镊子、解剖刀、滤纸等也可同时进行消毒。 2.灭菌前，应检查灭菌锅底部的水是否充足。 3.灭菌加热过程中，应使灭菌锅内的冷气放。 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 （二）培养基灭菌 4.灭菌时，应使在压力1.0-1.1kg/cm2 ，121℃， 保持15-20分钟即可。 5.灭菌完成后，应切断电源，使灭菌锅内的压力缓慢 降下来，接近“0”时，才可打开放气阀，取出培 养基。 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 自动高压湿热灭菌锅 电源 水位指示灯 温度、压力显示窗 温度压力设置钮 压力表 放汽阀 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 自动高压湿热灭菌方法 装锅 加水 封外盖 升温排冷气 升温保压 降压 出锅冷却 通电 设置参数 封内盖 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌 培养基高压灭菌所必需的最少时间 容器体积(mL) 121℃灭菌所需最少时间(min) 20-50 15 1000 30 250-500 25 75-150 20 培养基灭菌后取出放 在桌子上，让其凝固。 配好的培养基不要放 置时间太长以免干燥 变质，一般最多保持2 周左右。 （三）培养基存放 三、培养基配制及灭菌 园艺植物组织培养 园艺植物组织培养 三、培养基配制及灭菌