发酵工程发-第十章-氨基酸.ppt

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发酵工程-第十章-氨基酸;工业上重要氨基酸简介; 氨基酸可用作食品、饲料添加剂和药物。过去都采用动植物蛋白提取和化学合成法生产,现18种氨基酸均可采用发酵法和酶法生产,不仅成本下降、污染减少,还可组织大量生产,世界产量每年递增5%~10%。 在氨基酸产生菌选育中,过去多采用诱变育种方法,诱变结果不易控制,现采用基因工程和细胞融合技术,产量可成倍、甚至几十倍增加,生产成本大大下降。 如用基因重组构建的苏氨酸、色氨酸“工程菌”,比原始???株提高产量几十倍(产酸达50~60克/升),色氨酸成本从每公斤50美元降到23美元。用细胞融合构建的精氨酸融合株,精氨酸产量达108克/升,比其他生产菌株高2倍多。 ;谷氨酸发酵;二、谷氨酸的生物合成机理 1. 谷氨酸 (?-氨基戊二酸) O C-OH 第一代鲜味剂 H2N- C- H L-谷氨酸单钠盐——味精 H-C-H H-C-H H-C O OH L-型;; 葡萄糖 6-P-葡萄糖 6-P-葡萄糖酸 3-P-甘油醛 5-P-核糖 丙酮酸 乙酰CoA 草酰乙酸 柠檬酸 苹果酸 异柠檬酸 延胡索酸 琥珀酸 α- 酮戊二酸 谷氨酸 透过细胞膜 谷氨酸;;(1)EMP:丙酮酸,ATP,NADH2 (2)HMP:6-磷酸果糖 3-磷酸甘油酸 NADPH2:?-酮戊二酸还原氨基化必需的供氢体。 (3)TCA循环:生成谷氨酸前体物质?-酮戊二酸。 (4)CO2固定反应:补充草酰乙酸。 (5)乙醛酸循环:使琥铂酸、延胡索酸和苹果酸的量得 到补充,维持TCA循环的正常运转。 谷氨酸脱氢酶 (6)还原氨基化反应:?-酮戊二酸 谷氨酸;回补反应; 3.谷氨酸生产菌的生化特征 (1)有苹果酸酶和丙酮酸羧化酶。 (2)?-酮戊二酸脱氢酶活性弱,异柠檬酸脱氢 酶活性强,异柠檬酸裂解酶活性弱。 (3)谷氨酸脱氢酶活性高,经呼吸链氧化NADPH2 的能力弱。 (4)菌体本身利用谷氨酸的能力低。; 4.谷氨酸产生菌(全是细菌) 棒杆菌属 北京棒杆菌 C. pekinense Corynebacterium 钝齿棒杆菌 C. crenatum 谷氨酸棒杆菌 C. glutamicum 短杆菌属 黄色短杆菌 B. flvum Brevibacterium 产氨短杆菌 B. ammoniagenes 小杆菌属 嗜氨小杆菌 M. ammoniaphilum Microbacterium 节杆菌属 球形节杆菌 A. globiformis Arthrobacter; 共同点: 1)革兰氏阳性。 2)不形成芽孢。 3)没有鞭毛,不能运动。 4)需要生物素作为生长因子。 5)在通气条件下产谷氨酸(需氧微生物)。;三、谷氨酸发酵的工艺控制 (一)培养基 1. 碳源:淀粉水解糖、糖蜜、乙醇、烷烃 (1)淀粉水解糖的制备 (2)糖蜜原料; 2.氮源:铵盐、尿素、氨水 C/N=100:15?21,实际高达100:28 因为:1)用于调整pH。 2)分解产生的NH3从发酵液中逸出。 产酸阶段: NH4+不足:使?-酮戊二酸蓄积而很少有谷氨酸生成。 NH4+过量:促使谷氨酸生成谷氨酰胺。;3.无机盐:磷酸盐、镁、钾、钠、铁、锰、铜,其中 磷酸盐对发

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