实验五植物组织中过氧化氢酶的活力测定.pptVIP

实验五 、 植物组织中过 氧化氢酶活力测定 —— 高锰酸钾滴定法 一、实验目的 ? 1. 掌握酶活力测定的方法 ? 2. 了解过氧化氢酶在生物体中的作用原理 二、实验原理 ? 过氧化氢酶（ CAT ）属于血红蛋白酶，含有铁， 它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过 程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化 剂又是还原剂。 ? R(Fe 2+ )+H 2 O 2 = R(Fe 3+ +OH － ) ? R(Fe 3+ OH － ) 2 +H 2 O 2 = R(Fe 2+ ) 2 +2H 2 O+O 2 ? 据此，可根据 H 2 O 2 的消耗量或 O 2 的生成量测 定该酶活力大小。在反应系统中加入一定量 （反应过量）的 H 2 O 2 溶液，经酶促反应后， 用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多 余的 H 2 O 2 ，即可求出消耗的 H2O2 的量。 ? 5 H 2 O 2 +2KMnO 4 +4H 2 SO 4 =5O 2 +2KHSO 4 +8H 2 O+2MnSO 4 三、材料、试剂与器具 1. 材料： 小麦叶片 2. 试剂 （ 1 ） 10% H2SO4 ； （ 2 ） 0.2mol/L 磷酸缓冲液 pH7.8 ； （ 3 ） 0.1mol/L 高锰酸钾标准液：称取 KMnO4 （ AR