2020实验5诱导细胞融合聚乙二醇法.pptVIP

实验五 诱导细胞融合 —— 聚乙二醇法 一、实验目的 了解细胞融合的原理，初步掌握用 PEG 诱导 细胞融合的方法。 二、实验原理 聚乙二醇（ PEG ）结构为： CH2(OH)-(CH20CH2)n-CH2OH ； 相对分子质量在 2000-6000 均可用作细胞融合剂。 ? 普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构， 使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组， 由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼 此的表面张力作用，从而使细胞发生融合。 ? 细胞融合率 是指在显微镜的一个视野内，已发生融 合的细胞其细胞核总数与该视野内所有细胞 ( 包括 已融合的细胞 ) 的细胞核总数之比，通常以百分比 表示。 三、实验材料与用品 ? 材料： 鸡血红细胞 ? 试剂： （ 1 ） Alsver 液： （ 2 ） 0.85 ％生理盐水： （ 3 ） GKN 液： （ 4 ） Ringer 溶液： （ 5 ） Hanks 液： （ 6 ） 50 ％ PEG 混合液 （ 7 ） 0.2% 次甲基蓝 ? 仪器： 离心机，水浴 箱，电炉， 量筒，离 心管，注射器，试管， 移液管，烧杯， 吸管， 载玻片，盖玻片，显微 镜