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(1)来源:主要是从 原核生物 中分离纯化出来的。
生物选修三知识点 (2 )功能:能够识别双链 DNA分子的某种 特定 的核苷酸序列,并且使每一条链
基因工程的诞生(三个理论和三个技术): 中特定 部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开,因此具有 专一 性。
基因工程是在生物化学、 分子生物学和微生物学等学科基础上发展起来的, (3 )结果:经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形式: 粘性末端
正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程,具体有 三大理论
发现 和 三个技术突破。 (EcoRI 酶) 和平末端 (SmaI 酶 ) 。
1) 理论基础: DNA 是遗传物质; DNA 分子的双螺旋结构和半保留复 3.PCR 技术扩增目的基因
2. “分子缝合针”—— DNA连接酶
制;遗传密码的通用性和遗传信息传递的方式; (1)原理: DNA双链复制
(1) 两种 DNA连接酶( E ·coliDNA 连接酶和 T4- DNA连接酶)的比较:
2) 技术基础:限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割; DNA 连接酶 ①相同点:都缝合 磷酸二酯 键。 (2 )过程:第一步:加热至 90~ 95 ℃DNA解链 ;第二步:冷却到 55~60 ℃,
的发现与 DNA 片段的连接;基因工程载体的构建与应用 ②区别: E ·coliDNA 连接酶来源于 T 4 噬菌体 ,只能将双链 DNA 片段互补的 黏 引物结合到互补 DNA链 ;第三步:加热至 70~ 75 ℃, 热稳定 DNA聚合酶从引物
理论上的三大发现 性末端 之间的磷酸二酯键连接起来;而 T 4 DNA 连接酶能缝合 两种末 起始互补链的合成 。
⑴、发现了遗传物质—— DNA 端 ,但连接平末端的之间的效率较 低 。
(2)与 DNA 聚合酶作用的异同 :DNA 聚合酶只能将 单个核苷酸 加到已有的核苷酸
1944 年,艾弗里(
片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接 两个 DNA片段 的末端,形
⑵、揭示了遗传物质的分子机制: DNA 分子的双螺旋结构和半保留复制 成磷酸二酯键。
1953 年,沃森(,获 1958 年诺贝尔奖。
⑶、确立了遗传信息的传递方式:以密码形式传递
1963 年,美国尼伦伯格(,破译了编码氨基酸的遗传密码
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