3～5细胞融合技术·干细胞工程·克隆技术.ppt

2.(2012·哈尔滨模拟 ) 如图是利用现代生物工程技术治疗遗传 性糖尿病 ( 基因缺陷导致胰岛 B 细胞不能正常合成胰岛素 ) 的过程 设计图解，请据图回答： 归纳·核心考点 体验·双基考题 (1) 图中①、②所示的结构分别是 _______ 、 _______ ，④过程常 用的方法是 _______ 。 (2) 图中③、⑤所示的生物工程技术分别是 _______ 、 _______ ， 利用 _______ 技术快速扩增健康胰岛 B 细胞基因的过程中，目的 基因受热形成单链并与引物结合，在酶的作用下延伸形成 DNA ， 该酶的特点是 _______ 。该技术的原理是 _______ 。 (3) 过程④通常用②做受体细胞的原因是 _______ 。 (4) 图示治病的方法叫做 _______ ，与一般的异体移植相比最大 的优点是 _______ 。 归纳·核心考点 体验·双基考题 【解析】 (1) ①是细胞核，②是细胞核移植技术得到的胚胎干细 胞，④是重组载体导入受体细胞。 (2) ③是细胞核移植，⑤是动物细胞培养得到早期胚胎。 PCR 技 术可快速扩增 DNA ，该技术需要耐高温的 DNA 聚合酶催化。 (3) 转基因动物培养常用受精卵或早期全能胚胎干细胞作受体细 胞。 (4) 该图为治疗性克隆，自身细胞细胞核移植后得到的克隆器官 不会发生免疫排斥反应。 归纳·核心考点 体验·双基考题 答案： (1) 细胞核 内细胞团 ( 或胚胎干细胞 ) 显微注射法 (2) 核移植技术 早期胚胎培养技术 PCR 耐高温 DNA 双链复制 (3) 这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类 细胞、组织、器官 (4) 体外基因治疗 没有免疫排斥反应 归纳·核心考点 体验·双基考题 3.(2012·深圳模拟 ) 以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲 和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是 AA 和 BB 。据图分析回答： 归纳·核心考点 体验·双基考题 第三～五节 细胞融合技术 ? 干细胞工程 ? 克 隆技术 点击进入相应模块 动物细胞融合与单克隆抗体 1. 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、细胞 的全能性 动物细胞融合 原 理 细胞膜的流动性 归纳·核心考点 体验·双基考题 植物体细胞杂交 动物细胞融合 过 程 归纳·核心考点 体验·双基考题 植物体细胞杂交 相 关 酶 融 合 方 法 结 果 纤维素酶和果胶酶 动物细胞融合 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 物理法 : 离心、电激、振动； 化学法 : 聚乙二醇等试剂诱导 除物理法和化学法外还 可以用灭活的病毒诱导 杂种植株 克服了远缘杂交的不亲和性 , 获得杂种植株 杂交细胞 突破了有性杂交方法的 局限 , 使远缘杂交成为可 能 体验·双基考题 意 义 归纳·核心考点 2. 单克隆抗体的制备 (1) 制备过程： 注射特定抗原 的免疫小鼠 骨髓瘤 细胞 B 淋巴细胞 筛选培养 杂交细胞 专一抗体 检验阳性 克隆上述 杂交细胞 归纳·核心考点 体验·双基考题 专一抗体 检验阳性 将不同杂交 细胞分开 , 并克隆专一抗体， 检验阳性细胞 体外培养 体内培养 从培养液 中提取 从小鼠腹水 中提取 单克隆抗体 归纳·核心考点 体验·双基考题 (2) 关键环节： ①取相应 B 淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆 抗体。 ②细胞融合后需经二次筛选： 第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞 (B 淋巴细 胞和骨髓瘤细胞 ) 和融合的具有同种核的细胞 (BB 融合细胞、瘤瘤 融合细胞 ) 都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长。其特点是既能迅 速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。 第二次：经选择培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细 胞 ( 很多种杂交瘤细胞 ) ，需经克隆化培养和抗体检测，经筛选后 才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 归纳·核心考点 体验·双基考题 【高考警示钟】 1. 植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素 酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间质。 2. 灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。 3. 植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞 的全能性不能表达。 归纳·核心考点 体验·双基考题 比较三种造血干细胞移植的优点和缺点 优 点 骨髓移植 是经典的移植方法，效 果可靠 缺 点 寻找配型相同的骨髓难， 捐献者和患者都要遭受很 大的痛苦 外周血干 细胞移植 方法比较简单，对供者 安全，影响小，几乎无 不适反应 外周血干细胞数量采集困 难，不能满足移植所需数 量；收集的外周血干细胞 可能混杂有肿瘤细胞；费 用较高 体验·双基考题 归纳·核心考点 优 点 脐带血资