免疫组化技术常见问题及处理方法[宣贯].pptVIP

冰冻切片的处理 冰冻切片的组织抗原保存好 通常以5um的厚度为佳 冷风吹干后用纯丙酮固定2遍,干燥置入4 ℃冰箱短期保存，－20℃冰箱长期干燥保存 缺点是不易做出好的冰冻切片，易出现冰晶、细胞肿胀等现象 * 精品PPT | 实用可编辑 细胞涂片的处理 培养细胞或细胞涂片，应自然晾干后用纯丙酮固定2遍，4 ℃或－20 ℃冰箱保存 * 精品PPT | 实用可编辑 抗原修复 概念:应用物理或化学的方法将组织固定过程中封闭的抗原决定簇修复暴露的过程称为抗原修复 原因：甲醛固定过程中形成醛键和羧甲基而封闭部分抗原决定簇，固定时，蛋白与蛋白之间发生交联,可能会封闭抗原决定簇 * 精品PPT | 实用可编辑 抗原修复的方法 酶消化： 如胰蛋白酶、蛋白水解酶 热抗原修复（HIER）： 水浴；微波炉；高压锅；高压消毒锅；蒸汽室 超声波 以上综合运用 修复方法从强到弱为：高压修复、微波修复、胰酶修复 * 精品PPT | 实用可编辑 热抗原修复 更有效：染色结果更一致，操作更单一 事先确定的热修复时间可适用于几乎所有的组织 一抗可以进一步稀释（节省费用） 有些抗体只有采用热抗原修复才有效 * 精品PPT | 实用可编辑 高压锅热抗原修复 比微波更有效 能处理大批量的切片 达到更高的温度 加热均匀（不像微波炉有热点和冷点）和节省时间 * 精品PPT | 实用可编辑 高压锅热抗原修复 将高压锅中的