蒽酮硫酸比色法测定多糖含量.pdf

蒽酮 - 硫酸比色法测定多糖含量 一 . 实验原理 糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后 ，与蒽酮 (C H O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物呈蓝绿色。该物质在 620 nm处有最大吸 14 10 收，在 150 μg/mL 范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。该法有很高的 灵敏度，糖含量在 30 μg 左右就能进行测定。 二 . 试剂器材 蒽酮试剂： 精密称取 0.1g 蒽酮，加 80%浓 H SO 100 mL 使溶解，摇匀。当日配 2 4 制使用； 葡萄糖标准液 ：将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中， 12hr 后精密称取 100mg， 用蒸馏水定容至 100ml； 其他器材：分析天平、分光光度计、容量瓶 (100ml 、50ml 、10ml)、烧杯、具塞 试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等。 三 .