L-茶氨酸对肠道吸收与转运氨基酸的调节作用及机制.pdfVIP

摘 要 摘 要 肠道是机体吸收与转运氨基酸等营养物质的主要场所，且肠道对谷氨酰胺的利用 率提高时，能减少其他氨基酸的消耗。新食品原料L-茶氨酸是茶叶尤其是绿茶中的一 种特征性的非蛋白质氨基酸，与谷氨酰胺结构类似，其分解代谢产物谷氨酸是合成谷 氨酰胺的前体物质，可通过调节机体中谷氨酸、谷氨酰胺浓度起到神经保护、抗抑郁 等作用。目前对L-茶氨酸保护肠道、调节免疫等生物活性作用研究较多，但对其调节 氨基酸等营养物质吸收与转运的作用及机制有待探究。本研究通过L-茶氨酸低 （100mg/kg ）、中（300mg/kg ）、高（400mg/kg ）三种剂量干预SPF 级四周龄健康雄性 昆明小鼠28d ，采用HE 染色、生化指标分析、qRT-PCR 、Western blot 等方法，从小 鼠体重、肠道形态结构、肠道与血清游离氨基酸含量、肠道氨基酸转运载体mRNA 与 蛋白表达及信号通路等方面，研究分析了L-茶氨酸对肠道吸收与转运氨基酸的调节作 用及机制，探索了L-茶氨酸（300mg/kg ）、速溶绿茶（300mg/kg ）、EGCG （300mg/kg ）、 L-茶氨酸+EGCG 【（60mg L-茶氨酸+240mgEGCG ）/kg 】对肠道吸收与转运氨基酸的调 节作用及机制，以期为食品营养干预多元化发展、促进L-茶氨酸等茶叶功能成分深层 次利用提供科学依据。主要研究结果及结论如下： 1）L-茶氨酸对肠道吸收氨基酸的调节作用及机制。与正常组相比，L-茶氨酸各剂 量组采食量、体重增长、器官指数无显著变化；高剂量组升高了血清AKP 及TP 含量、 降低了BUN 含量（P0.05 ），与谷氨酰胺干预效果无显著差异；各剂量组降低了血清、 回肠大部分游离氨基酸含量；随着剂量的增加，各部位的绒毛长度增加，且中、高剂 量组十二指肠与空肠的绒毛高度、V/C 比值以及与肠道生长相关的氨基酸含量增加。 2 ）L-茶氨酸对小鼠肠道转运氨基酸的调节作用及机制。与正常组相比，L-茶氨 + + 酸低剂量组十二指肠4F2hc 、y LAT1 、ASCT2 ，空肠EAAT3 、y LAT1 、CAT1、ASCT2 、 0 + 0 B AT1 ，以及回肠EAAT3 、EAAT1 、4F2hc 、y LAT1 、CAT1、ASCT2 、B AT1 的mRNA + 表达上调（P0.05 ）；十二指肠4F2hc 、y LAT1 ，空肠EAAT1 、EAAT3 、CAT1、ASCT2 、 0 + B AT1 ，以及回肠4F2hc 、y LAT1 、CAT1 的蛋白表达上调（P0.05 ）；十二指肠、回肠 的mTOR 与S6 以及空肠S6 的磷酸化水平升高（P0.05 ）。中、高剂量组十二指肠、空 + 0 肠、回肠EAAT3 、EAAT1 、4F2hc 、y LAT1 、CAT1、ASCT2 、B AT1 的mRNA 与蛋 白表达上调（P0.05 ），mTOR 、S6K1、S6 的磷酸化水平升高（P0.05 ）。 I 湖南农业大学硕士学位论文 3 ）L-茶氨酸与EGCG 对肠道吸收和转运氨基酸的协同调节作用及机制。与正常组 相比，在作用效果上，L-茶氨酸+EGCG 组血清部分必需氨基酸、回肠大部分游离氨基 酸含量降低 （P0.05 ），十二指肠、空肠大部分游离氨基酸含量增加 （P0.05 ），且小 肠大部分游离氨基酸含量高于L-茶氨酸组、EGCG 组 （P0.05 ）；EGCG 组血清部分非 必需氨基酸、十二指肠游离氨基酸含量增加 （P0.05 ），空肠、回肠大部分游离氨基酸 含量降低 （P0.05 ）；速溶绿茶组血清部分非必需氨基酸及十二指肠