PCR-DGGE技术(精品文档).pdfVIP

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  • 2020-12-05 发布于广东
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PCR-DGGE 技术 一、实验原理 变性梯度凝胶电泳 (denatured gradient gel electrophoresis,DGGE )最早是 Lerman 等 人于 20 世纪 80 年代初期发明的,起初主要用来检测 DNA 片段中的点突变 。Muyzer 等人在 1993 年首次将其应用于微生物群落结构研究 。后来又发展出其衍生技术, 温度 梯度凝胶电泳 (TGGE )。该技术被广泛用于微生物分子生态学研究的各个领域, 目前已 经发展成为研究微生物群落结构的主要分子生物学方法之一。 双链 DNA 分子在一般的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,其迁移行为取决于其分子大小和 电荷。不同长度的 DNA 片段能够被区分开,但同样长度的 DNA 片段在胶中的迁移行 为一样,因此不能被区分。 DGGE 技术在一般的聚丙烯酰胺凝胶基础上,加入了变性剂 (尿素和甲酰胺)梯度,从而能够把同样长度但序列不同的

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