医疗器械微生物检验[宣贯].pptVIP

细菌、霉菌及酵母菌计数 在特殊情况下，若营养琼脂培养基上长有霉菌和酵母菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌，则应分别点计霉菌和酵母菌、细菌菌落数。然后将营养琼脂培养基上的霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数，与玫瑰红钠琼脂培养基中的霉菌和酵母菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较，以菌落数较高的培养基中的菌数为计数结果。 * 精品PPT | 实用可编辑 * 精品PPT | 实用可编辑 控制菌检查法验证 菌种（菌液制备同前） 大肠埃希菌　　　［CMCC（B）44 102］ 金黄色葡萄球菌　［CMCC（B） 26 003］ 乙型副伤寒沙门菌［CMCC（B） 50 094］ 铜绿假单胞菌 　［CMCC（B） 10 104］ 生孢梭菌 　　　　[CMCC(B) 64 941] * 精品PPT | 实用可编辑 控制菌检查法验证 （1）试验组 取规定量供试液及10cfu~100cfu试验菌加入增菌培养基中，依相应控制菌检查法进行检查。当采用薄膜过滤法时，取规定量供试液，过滤，冲洗，试验菌应加在最后一次冲洗液中，过滤后，注入增菌培养基或取出滤膜接入增菌培养基中。 （2）阴性菌对照组 设立阴性菌对照组是为了验证该控制菌检查方法的专属性。方法同试验组，验证大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌检查法时的阴性对照菌采用金黄色葡萄球菌；验证铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌，梭菌检查法时的阴性对照菌采用大肠埃希菌。阴性对照菌不得检出。 结果判断 阴性菌对照组不得检出阴性对照菌。若试验组检出试验菌，按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该控制菌检查；若试验组未检出试验菌，应采用培养基稀释法、离心沉淀法 、薄膜过滤法、中和法等方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法验证。 * 精品PPT | 实用可编辑 大肠埃希菌检验 取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2），直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的胆盐乳糖培养基中，培养18~24小时，必要时可延长至48小时。 取上述培养物0.2ml，接种至含5ml MUG培养基的试管内，培养，于5小时、24小时在366nm紫外线下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照。若管内培养物呈现荧光，为MUG阳性，不呈现荧光，为MUG阴性。观察后，沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液，液面呈玫瑰红色，为靛基质阳性；呈试剂本色，为靛基质阴性。本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性。 * 精品PPT | 实用可编辑 大肠埃希菌检验 MUG 靛基质试验 * 精品PPT | 实用可编辑 大肠埃希菌检验 如MUG阳性、靛基质阳性，判供试品检出大肠埃希菌；如MUG阴性，靛基质阴性，判供试品未检出大肠埃希菌；如MUG阳性、靛基质阴性，或MUG阴性、靛基质阳性，均应取胆盐乳糖培养基的培养物划线于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养18～24小时。 若平板上无菌落生长、或生长的菌落与下表所列的菌落形态特征不符，判供试品未检出大肠埃希菌 。若平板上生长的菌落与下表所列的菌落形态特征相符或疑似，应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的生化试验，确认是否为大肠埃希菌。 * 精品PPT | 实用可编辑 大肠埃希菌检验 大肠埃希菌菌落形态特征 培养基 菌 落 形 态 曙红亚甲蓝琼脂 呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色、菌落中心呈 深紫色或无明显暗色中心、圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，常有金属光泽 麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深　 桃红色，圆形，扁平，边缘整齐， 表面光滑，湿润 * 精品PPT | 实用可编辑 大肠菌群检验 取含适量（不少于10ml）的胆盐乳糖发酵培养基管3支，分别加入1：10的供试液1ml（含供试品0.1g或 0.1ml）、1：100的供试液1ml（含供试品0.01g或 0.01ml ）、1：1000的供试液1ml（含供试品0.001g或 0.001ml），另取1支胆盐乳糖发酵培养基加入稀释液1ml作为阴性对照管。培养18~24小时。 * 精品PPT | 实用可编辑 概述 微生物：形体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物 特点： 1、个体微小，一般0.1mm 2、构造简单，有单细胞的，简单多细胞 的，非细胞的 3、进化地位低 分类：原核类：二菌，四体（细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体） 　 真核类：真菌，原生动物，显微藻类　　 非细胞类：病毒，亚病毒 * 精品PPT | 实用可编辑 * 精品PPT