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- 2020-12-08 发布于四川
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专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定 一、基础知识分析 (一)DNA的提取原理 1、DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 问题思考与讨论: ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下, DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的? ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出? NaCl浓度为 0.14 mol/L时DNA的溶解度最低。小于或大于0.14 mol/L ,溶解度就逐渐增大。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离 2、DNA在酒精溶液中的溶解性 3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响 ②大多数蛋白质不能忍受60-80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋 白质,但对DNA没有影响 (二)、DNA的鉴定原理 ① DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂 ②甲基绿 (绿色) 二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 (一)实验材料的选取 原则上只要含DNA的生物材料都可以,但是选取D
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