乳酸菌分离制作酸奶的实验报告.docxVIP

实习报告 实习名称 微生物课程实习 系另 生物与化学工程系 年级专业 2018级生物工程 学生姓名 乐一鸣 1040903054 指导老师 蒋盛岩王瑶琼 邵阳学院 2018 年 09月 19 日 一．实习时间、实习地点和实习单位： 2018年 9月 3日—9月 16日 邵阳学院李子园校区 3栋 104室 二．实习过程概述： 一）实习动员会 2018年 9月 3日上午 二）实习工作准备 1. 时间：2 天 2. 内容 1）分组制订详细地实习方案 . 2）分组选择和使用所需地仪器 . 3）分组配制各种试剂、培养基并进行正确地消毒与灭菌 . 三）乳酸菌地分离纯化 1. 时间：7 天 2．内容 1）无菌操作倒平板、十倍稀释法、划线分离或涂布平板法 , 恒温培养 2）菌落观察与镜检 3）筛选生产用菌株 ⑷菌种传代培养 菌种活化与扩大化） 四） 乳酸菌饮料地制作 时间：3 天 2. 内容 1）制备发酵液 2）接种发酵菌剂并发酵生产 3）观察发酵情况 ＜4）品尝发酵产品 , 进行质量评价 ＜5）记录结果 ＜五）书写实习报告 时间：1天 三．主要实习岗位和实习内容： 1、实验药品 新鲜乳酸饮料 ＜市售）、脱脂奶粉、蔗糖、 1.6%溴甲酚绿乙醇溶液 （ 溴甲 酚绿、无水乙醇 ＞、酵母膏、琼脂、革兰氏染液 ＜结晶紫染液、卢戈氏碘液、 95%乙醇、 沙黄）、 75%乙醇、香柏油、 1mol/L NaOH、1mol/L HCl 、碳酸钙； b5E2RGbCAP 0.4gNaOH 固体、 4.2ml 浓 HCL（ 分析纯 ＞ 、 20gCaCO3 固体、酵母膏 20g 、琼脂 30gp1EanqFDPw 香柏油、脱脂奶粉 100g 、蔗糖 10g； 2、 仪器与设备 高压蒸汽灭菌锅、恒压干热灭菌箱、超净工作台、光学显微镜、培 养箱、pH试纸、酸乳瓶、培养皿＜? 9或? 12）、试管、300ml三角瓶 ＜带玻珠）、移 液管、天平、牛角匙、电炉、量筒、漏斗、漏斗架、玻璃棒、棉塞、吸管、线绳、标 签、500ml锥形瓶、250ml锥形瓶、250ml烧杯、酒精灯、石棉网、接种针 ＜环）、擦镜 纸 DXDiTa9E3d 3. 操作步骤 方案确立及领取物品 实验开始前我们组织了组员通过上网查资料和讨论等方式初步确立了实验方案 , 通过与老师协商 , 将实验方案进一步详细化 , 最终确立了方案 . RTCrpUDGiT 9 月 5日上午领取 25只试管、 3个三角瓶、 1 个分液漏斗、 10支移液管、 2个量 筒、 2 个洗个球、 7 个烧杯、一个台秤和一个试管架 . 5PCzVD7HxA 乳酸菌地分离纯化 3.2.1 分离 （1）配制BCG牛乳培养基,分装三角瓶,包扎,灭菌备用? BCG牛乳培养基配制 A溶液：脱脂乳粉100g,水500ml,加入1.6%溴甲苯酚绿＜BCG乙醇溶液1ml,80 C灭菌 20min.＜1.6%溴甲苯酚绿＜BCG乙醇溶液用1.6g溴甲酚绿加入20ml无水乙醇中,再加 水至 100ml 制成） jLBHrnAILg B溶液：酵母膏10g,水500ml,琼脂20g,PH6.8,121 C湿热灭菌20min. 以灭菌操作趁热将 A 溶液和 B 溶液混合均匀后倒平板 . 结果与分析： 两次用80C灭菌A液制成地BCG培养基菌检结果都染菌了 ,培养基呈淡绿色；而用 106°C灭菌A液制成地BCG培养基菌检结果没染菌.XHAQX74J0X 说明我们80C对A液水浴灭菌达不到灭菌要求，最后都用106C灭菌地A液制作BCG培 养基. 2）样品地处理 按照无菌操作要求 , 从市售新鲜酸乳中吸取 10ml 检样, 放入装有 90ml 无菌水地三 角瓶内, 振摇混匀 . 3）分离方法 倒培养基 在无菌室，先用紫外线照射半小时把表面菌灭了 ，在通风10min后,每培养皿倾注约 15ml左右已溶化地BCG^乳培养基,立即放在桌上摇匀,冷却凝固后即成平板.LDAYtRyKfE 十倍稀释法 将检样充分摇匀后 , 用十倍稀释法稀释成 1 0-1、 1 0-2、 1 0-3、 1 0-4、 1 0-5各种稀释度地 样品液 . Zzz6ZB2Ltk 分离 直接用接种环蘸取10-4、10-5两个稀释度地试管中原液,在BC倂乳培养基琼脂平 板上划线分离，每稀释度做两个平皿?置40C培养箱中培养48h.如出现圆形稍扁平地黄 色菌落及周围培养基变为黄色者初步定为乳酸菌 . dvzfvkwMI1 结果与分析： 我们蘸取10-5,10 - 4两个稀释度同时接种到两个培养基时，发现传代后，只有一个培 养基上长出少量黄色菌落； rqyn14ZNXI 说明我们地检样浓度太低造成最后菌落太少 , 我们接下来都转而蘸取 10- 1,10- 2两个 稀释度地试管中原液 , 结果菌落比较多 . Em