实验二、PCR(不跑电泳)教学文案.pptVIP

实验材料与试剂 1、DNA模板(template)： λ 噬菌体的质粒DNA 2、dNTP: 4种dNTP混和物 3、10× PCR缓冲液(buffer): 组分如下: 15mmol/L MgCl2 500mmol/LKCl 100mmol/L Tris.HCl (pH8.3) 0.1%明胶 4、引物(primer): 上游引物（M13 F），下游引物（M13 R）（见“实验指导”） 6、Taq DNA聚合酶 (Taq polymerase) PCR的基本步骤 1、PCR反应体系的建立 取0.2ml的薄壁离心管，按表1顺序加入试剂→稍混匀，短暂离心把溶液甩至管底。 2、PCR的变温程序（热循环反应） 按表2设置PCR反应的变温程序→把离心管放进PCR仪进行扩增→反应结束后低温保存或检测 3、PCR扩增产物的电泳检测 (下次实验) 实验二、PCR(不跑电泳) PCR的种类和PCR仪 普通PCR 梯度PCR 实时荧光定量PCR Long Gene ABI Bio-rad Eppendorf 全触摸屏PCR仪（Bio-Rad） 什么是聚合酶链式反应（PCR）？ 聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction，PCR）是模拟DNA的复制过程，在体外特异性扩增DNA片段的方法，从而获得大量的同一序列DNA。