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培养基配制及适用 性检查标准操作规 程 文件名称 培养基配制及适用性检查标准操作规程 文件编号 SMP-10-QC-009 版本号 00 起草部门 质量控制部 审核部门 批准人 起草人 审核人 批准日期 起草日期 审核日期 生效日期 颁发部门 质量控制部 分发号 分发部门 质量保证部质量控制部 目的： 建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操 作流程。 范围： 适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。 依据： 〈〈药品生产质量管理规范（ 修订）》、〈〈中华人民共和国药典》 第四部 职责： 微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作，使日常检 验能够顺利进行。 微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。 内容 1培养基的申购 根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养 基申购。申购时需指定培养基供应商，必要时进行供应商审计。 2培养基的验收 2.1培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。验收内容包括核对品 名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无 破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。 2.2验收合格后，登记于〈〈培养基领用台账》（附记录文件编号： SMP- 10-QC-009-02 （00））。 3培养基的贮藏 3.1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室，使培养基处于低温、干燥、和 避光条件下。已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库。 3.2灭菌好的培养基应进行预培养 72h检查无菌后，置4?8C冷藏保存 待用。灭菌后培养基储存期为 7天。 4培养基的配制 4.1培养基的配制和使用应填写〈〈培养基配制及使用记录》（附记录文 件编号：SMP-10-QC-009-02 （00））。 4.2培养基配制批号原则：原材料批号 -配制日期：比如1月1日配制的 培养基，培养基干粉批号 000000,配制批号为：00。配制好的培养基贴 〈〈培养基标签》（附记录文件编号： R-SMP-10-QC-009-03。（注：同 一天同一培养基配置多次的，在原批号后加“ -”加“数字”表示，如 00-01） 4.3培养基配制方法 4.3.1使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配 制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础 文档仅供参考，不当之处，请联系改正。 成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养 基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号， pH 值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间），配 制日期、人员等，以便溯源。 4.3.2水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，特殊说明时采用去 离子水和蒸馆水。培养基配制所用容器和配套器具应洁净。对热敏感 的培养基如糖发酵培养基其分装容器应先进行预灭菌，以保证培养基 的无菌性。 4.3.3称量与分装： 快速称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口 罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末）。以免 吸潮。先加入适量的水，充分混合。注意避免培养基结块，然后加水 至所需的量。根据说明书要求选择是否加热。分装体积不超过容器体 积的2/3。配制斜面等含琼脂的培养基也需加热煮沸至完全溶解后分 装。 4.4 pH值的测定和调整 pH值采用pH计进行检测，温度 25± 2C。取配后培养基10ml进行 灭前pH测定。另取20ml于50ml三角瓶与同批配制培养基同时灭菌冷 却至25± 2C检测灭后PH。灭菌前后pH应按下表进行控制。灭菌前可 使用浓度约为40g/L （约1mol/L）的氢氧化钠溶液或浓度约为 36.5g/L （约1mol/L）的盐酸溶液进行缓慢调整，避免重复调整而增加离子浓 度。灭菌后培养基不符合标准时视为不合格，不进行使用。 4.5培养基灭菌 培养基和试剂应采用湿热灭菌法或过滤除菌法。 湿热灭菌在高压灭 菌锅或蒸汽灭菌柜中进行，容器具若需湿热灭菌时，灭菌条件为 121 C 灭菌30 min。培养基严格按说明书条件进行灭菌。培养基灭菌后应立即 取出，不得存放于高压灭菌器中。 5培养基的质量控制 5.1计数培养基适用性检查 5.1.1菌种及菌液制备 菌种：试验用菌株的传代次数不得超过 5代（从菌种保藏中心获得 的干燥菌种为第 0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保 证试验菌株的生物学特性。计数培养基适用性检查和计数方法适用性 试验用菌株见表1。 菌液制备：按表 1规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、 铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆月东液体培养基 中，35C培养18?24小时，取上述培养物 1ml加入9ml 0.9%无菌氯化 钠溶液中，制成10-1的菌液，依法10倍稀释至10-7,分取各菌悬液 1ml注入平皿中，