抑菌试验方法.docxVIP

实用标准文案 抑菌圈测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散，抑制试验菌的繁殖，在抑菌物质的周围形成透明圈，即抑菌圈。 管碟法测定生物效价：利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。 制药企业，药检所常常进行抗生素的效价测定，最普遍 的方式就是管碟法测定生物效价。管碟法测定生物效价实验中存 在大量抑菌圈测量工作，常规都是用游标卡尺手工测量抑菌圈的 直径，如今可以用仪器自动进行分析，提高检测精度，减少测量 误差。 迅数 -自动抑菌圈测量系统是通过 CCD 采集数字图像 后，进行自适应差分滤波预处理，采用改进的四叉树交叉熵分割 算法进行准确快速的分析，精确检测出抑菌圈直径数据，最后对 数据建模统计，自动得到分析结果。所有分析过程只要一秒就可 以完成。 手动测量存在的问题有： 重现性差，准确性不够：同一培养皿，不同的人测量结果有差异； 当抑菌圈呈卵原形、边缘模糊 或出现双层圈 时，边界确 精彩文档 实用标准文案 定的人为误差大； 一个培养皿内有大量 抑菌圈时，如做菌种筛选时，无法人工测量； 自动抑菌圈测量的好处在于：快速、精度高、重现性好、操作简单。 示意 ;将试样剪成直径为 2-3 公分的园片 ,紧紧平贴在已接种试验菌种的 FDA 琼脂培养基表面上 ,经 37 ℃24 小时培养 ,培养基表面上长出密密麻麻的菌落 ,?而试样周围有一个不长菌落的 晕圈.测量晕圈环的宽度 ,用毫米表示 .(如果没有晕圈 ?,应揭开试样 , 检查样品复盖若无菌落可视为样品具有非溶出性抗菌作用 .应进一步用摇晃烧瓶 ?--菌落数测定法评价效将细菌植入或嫁接入营养琼脂培养基的表面，通过在营养琼脂培养基上形成的抑制圈来评估其抗菌效果。目前普遍采用该方法来观测抗菌素的抗菌效果。 图 1 描述了抑菌圈测试方法。 图 1: 涂层后基于抑菌圈的抗菌测试 日本工业标准 (JIS)Z2801:20009 和 ASTME2180-0110 是目前使用最广泛的测试评估方法。使用 JISZ2801 方法，在涂层表面接种细菌细胞悬液并通过无菌聚丙烯膜或无菌载玻片使其紧密接 触一定时间， 通常为 24h 。只要求 (但不限于 )测试两种菌株： 金黄 色葡萄球菌 (ATCC#6538) 和大肠杆菌 (ATCC#11229) 。抗菌活性值由抗菌产品和未经处理产品在 24 小时接触后的活细胞数的对数值的差异决定。通过测试的产品，其细菌对数减少值不应小于 精彩文档 实用标准文案 2.0。图 2 描述了 JIS 测试方法。 精彩文档