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项目二 细菌病的实训室诊断 实训一 显微镜油镜的使用及细菌形态结构的观察 微生物实训室的注意事项 在微生物实训室,可能接触病原微生物,如操作不慎可造成实训室污染甚至人员感染,因此,实训者必须严格遵守实训室规则,认真进行操作,防止发生意外事故。 一、实训前认真预习实训步骤,明确实训目的和内容。 二、进入实训室必须着工作衣帽,如粘有可传染的材料,应脱下用消毒药浸泡过夜或高压灭菌后洗涤。 三、实训中要保持安静、认真操作和观察、详细记录实训结果,并认真写出实训报告。 微生物实训室的注意事项 四、牢固树立无菌操作观念,用过的培养物、病料、实训动物及器材均须放入指定的消毒容器内消毒或灭菌,不准随意乱放或用水冲洗。如遇污染,速报告老师,以便采取相应措施处理。 五、注意安全。一切易燃品应远离火源,酒精灯、电炉等用完立即熄灭。 六、爱护公物,节约水电和实训用品。 七、实训完毕,整理桌面、洗手消毒,方可离开实训室。 一、实训目标 掌握油镜的识别、使用及保养方法。 识别并绘制细菌的基本形态图,了解本技能在生产实践中的意义。 二、实训器材 光学显微镜的构造 三、油镜的识别 四、油镜的使用原理:主要避免部分光线折射的损失 五、注意事项 香柏油的用量以1滴为宜。 油镜头用毕,必须用擦镜纸拭净香柏油,不可用手、棉花或其他纸张擦拭。 乙醇乙醚(二甲苯)用量1滴为宜。 转换物镜头时,应使用物镜转换器,不可掰着镜头转换 实训过程产生的垃圾请放置指定位置,不可随便丢弃 六、油镜的使用方法及步骤 六、油镜的使用方法及步骤 六、油镜的使用方法及步骤 五、油镜的使用方法及步骤 七、常见的细菌形态——病料触片(美兰染色) 七、常见的细菌形态——细菌培养物涂片(革兰氏染色)示教 八、显微镜的整理及油镜的保养 降低载物台和集光器 擦油镜头(3遍) 以擦镜纸拭去镜头上的香柏油 在擦镜纸上滴加少量乙醇乙醚 用擦镜纸拭去乙醇乙醚 把低倍镜转至中央,高倍镜和油镜转成“八”字形,叠好电源线,用绸布包好放入镜箱,存放于阴凉干燥处,避免受潮生锈。 九、小 结 看细菌要用油镜头。 油镜的识别:有三种方法(最长,100倍、白色色环) 使用方法:(先上升,后下降,先粗调,后细调) 保养方法:(擦油,擦残留的油,擦残留的乙醇乙醚) 认识了显微镜下的球菌和杆菌,以便在未来工作中进行细菌病的实验室诊断。 十、作 业 提交实训报告 用铅笔绘制显微镜下细菌的真实形态图(必须标明放大倍数) 注意:实训报告要记录真实试验过程和结果,不应盲目抄袭书本或别人的实训报告。 实训报告书写要求 实训报告内容应包含以下项目:(1)实训序号、题目 、姓名(2)实训器材 (3)实训目标与原理要求尽可能简洁、清楚。(4)实训步骤(5)实训结果 绘制显微镜下的真实细菌形态(本次实训) (6)讨论:对实训结果进行有根据的科学分析,应实事求是,并在分析的基础上推导出带有共同规律结论。如果试验结果未达预期目的或出现反常现象,应分析其可能原因。 项目一 细菌病的实训室诊断---显微镜油镜的使用及细菌形态结构的观察 显微镜油镜的使用及细菌形态结构的观察 显微镜 香柏油 擦镜纸 细菌染色标本片 乙醇乙醚或二甲苯 染色标本片 擦镜纸 香柏油 乙醇乙醚 显微镜 粗调节器 细调节器 电光源 目镜 压夹 物镜转换器 载物台 集光器 物镜 推进器 亮度调节旋钮 显微镜左侧视图 显微镜右侧视图 油镜头最长 镜头上有一白色色环 放大倍数100× 或oil等字样 白—100× 蓝色—40或60× 绿色—20 × 黄色—10 × 红色—4 × A a B b A B b a 载玻片(n=1.52) 油镜 空气(n=1.0) 空气(n=1.0) 载玻片(n=1.52) 油镜 香柏油(n=1.515) 空气(n=1.0) 空气与玻璃折光率相差较大,光线穿过载玻片进入空气,发生折射较多,进入油镜光线较少,视野不明亮 香柏油与玻璃折光率相近,光线穿过载玻片进入香柏油,发生折射较少,进入油镜光线较多,视野明亮 调节视野亮度 2 放置标本片 3 镜检 4 放置显微镜 1 放置在平稳的实训台上 调节视野亮度 2 放置标本片 3 镜检 4 放置显微镜 1 接通电源,打开开关 尽量升高集光器 完全打开光圈 适当调节亮度 集光器升降调节器 光圈调节手柄 调节视野亮度 2 放置标本片 3 镜检 4 放置显微镜 1 在细菌标本片的欲检部位滴加一滴香柏油 将细菌标本片固定在载物台正中 调节视野亮度 2 放置标本片 3 镜检 4 放置显微镜 1 将油镜头转至中央 升载
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