实验一蛋白质定量舛Lowry法.pptVIP

蛋白质的定量测定 (改良 Lowry法)  实验目的 1、熟悉改良 Lowry法测定血清蛋白质含量的原理 掌握直接比色法和标准曲线法的应用 3、熟悉分光光度计的使用。  实验原理 考马斯亮蓝法 紫外分光光度法 Lowry法  实验原理 蛋白质肽键 碱性铜试剂 紫红色蛋白质-铜的络合物 酪氨酸、色氨酸等 氨基酸残基 酚试剂 水分如蓝崇色溶液 A=KLC HC-R 蛋白威等含肽链化合物 紫红色络合物 直接比色法 标准曲线法  实验步骤 测标空 试剂(ml) 定准白 标准蛋白溶液 0.20.40.60.8 (250μg/ml) 0稀释血清04 0.9% NaC 0.60.40.2 碱性铜试剂 5.05.05.05.05.05.0 5.05.05.0 混匀,37℃保温20分钟 酚试剂 0.5 0.50.50.50.50.50.50.5 混匀,37℃保温30分钟  四、结果与分析 血清蛋白质含量的计算 直接比色法:根据标准管吸光度值计算血清中蛋白质 的含量 标准曲线法:绘制标准曲线,根据标准曲线求得血清 中蛋白质的含量