基因敲除资料讲解.pdfVIP

基因敲除 基因敲除（ knockout ）是指一种遗传工程技术，针对某个序列已知但功能未知的序列，改变 生物的遗传基因， 令特定的基因功能丧失作用， 从而使部分功能被屏蔽， 并可进一步对生物 体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。 指外源 DNA 与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，从而代替受体细胞 基因组中的相同 / 相似的基因序列，整合入受体细胞的基因组中。此法可产生精确的基因突 变，也可正确纠正机体的基因突变。 基因嵌入又称基因置换， 它是利用内源基因序列两侧或 外面的断裂点， 用同源序列的目的基因整个置换内源基因。 用于基因敲除和基因嵌入的技术 有 Cre/Lox P 系统、 FLPI系统等。 步骤： 获得干细胞 基因敲除一般应用于鼠， 而最常用的鼠的种系是 129 及其杂合体， 因为这类小鼠具有自发突 变形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的倾向， 是基因敲除的理想实验动物。 而其他遗传背景的胚胎干细 胞系逐渐被发展应用， 最来自于 C57BL/6 ×CBN/JNCrjF1