可溶性蛋白质含量的测定..docVIP

可溶性蛋白质含量的测定 考马斯亮蓝 G— 250 染色法 一．原理 考马斯亮蓝 G— 250 染色法是利用蛋白质与染料结合的原理， 定量地测量蛋白质浓度的快速 灵敏的方法。考马斯亮蓝 G— 250 存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。它和蛋白质通 过范德瓦尔键结合， 在一定蛋白质浓度范围内， 蛋白质和染料结合符合比尔定律。 此染料与 蛋白质结合后颜色由红色转变成蓝色，最大光吸收由 465nm 变成 595nm，通过测定 595nm 处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程，约 2min 即可反应完全，呈现最大光吸收，并可稳定 1h 之后， 蛋白