12基因工程的基本操作程序用.ppt

请回答基因工程方面的有关问题： (1) 利用 PCR 技术扩增目的基因，其原理与细胞内 DNA 复 制类似 ( 如下图所示 ) 。图中引物为单链 DNA 片段，它是子 链合成延伸的基础。 ①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为 _______ 。 ②在第 _______ 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链 等长的 DNA 片段。 （ 1 ）从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为 。 （ 2 ）在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核 苷酸链等长的 DNA 片段。 15/16 三 ① 概念： PCR 全称为 _______________ ，是一项 在生物 ____ 复制 ___________ 的核酸合成技术。 ③前提条件： _______________________ ； 其它条件： ___________ 、 __________________ 、 ________________ 。 ②原理： __________ ④方式：以 _____ 方式扩增，即 ____ （ n 为扩增循 环的次数） ⑤结果： 多聚酶链式反应 已知目的基因的核苷酸序列 特定 DNA 片段 DNA 复制 四种脱氧核苷酸 DNA 引物 DNA 模板 热稳定 DNA 聚合酶 指数 2 n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 体外 ⑥过程： a 、 DNA 变性（90℃ - 95℃）：双链 DNA 模板 在热作用下， _____ 断裂，形成 ___________ b 、退火（ 复性 55℃ - 65℃）：系统温度降低，引 物与 DNA 模板结合，形成局部 ________ 。 c 、延伸（70℃ - 75℃）：在 Taq 酶的作用下，从 引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补 的 ________ 。 氢键 单链 DNA 双链 DNA 链 1 个 DNA 分子进行 PCR 扩增 , 循环 4 次， 理论上至少需要几个引物？ 2 ×（ 2 n -1 ） (n 为循环次数 ) （ 2 4 -1 ）× 2=30 1 、在遗传工程中，若有一个控制有利性状的 DNA 分子片段为 ATGTG ／ TACAC ，要使其数量增多，可 用 PCR 技术进行人工复制，复制时应给予的条件是 ①双链 DNA 分子为模板 ② ATGTG 或 TACAC 模板链 ③四种脱氧核苷酸 ④四种核苷酸 ⑤ DNA 聚合酶 ⑥热 稳定 DNA 聚合酶⑦引物 ⑧温度变化 ⑨恒温 A ．①③④⑦⑨ B ．①④⑥⑦⑧ C ．②⑤⑥⑦⑨ D ．①③⑥⑦⑧ D 2 、在基因工程中，把选出的目的基因（共 1000 个脱氧 核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是 460 个）放入 DNA 扩增仪中扩增 4 代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱 氧核苷酸的个数是 A.540 个 B.8100 个 C.17280 个 D.7560 个 B 1 、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最 方便方法是 A 、化学合成法 B 、基因组文库法 C 、 cDNA 文库法 D 、聚合酶链反应 2 、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是 ①从基因文库中获取目的基因 ②利用 PCR 技术 扩增目的基因 ③反转录法 ④通过 DNA 合成仪利 用化学方法人工合成 A ．①②③④ B ．①②③ C ．②③④ D ．②③ A D 3 、目的基因主要是指 _______________ 的结构基因。 获得目的基因的常见方法有三种：（ 1 ）从基因文库中 获取目的基因，根据基因的 _________ 序列，基因在 ________ 上的位置，基因的 ________ 产物 mRNA ，基 因的 _______ 产物蛋白质等获取目的基因。（ 2 ）利用 PCR 技术扩增目的基因，该技术是一项在 ________ 完 成的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的 ________ 序列，以便于合成 _________ 。（ 3 ）如果基 因较小且核苷酸序列已知，可以通过 ____________ 方 法。 编码蛋白质 核苷酸 染色体 转录 表达 体外 核苷酸 引物 人工合成 PCR 技术扩增与 DNA 复制的比较 PCR 技术 DNA 复制 相 同 点 原理 原料 条件 不 同 点 解旋 方式 场所 酶 结果 碱基互补配对 四种脱氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA 在高温下 变性解旋 解旋酶催化 体外复制 细胞核内 热稳定的 DNA 聚合酶 细胞内的 DNA 聚合酶 大量的 DNA 片段 形成整个 DNA 分子 用一定的 _________ 切割 质粒，使其出现一个切 口，露出 ____________ 。 用 _____________ 切断目 的基因，使其产