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新冠病毒核酸检测SOP 新冠病毒核酸检测SOP 1.目 的 1.目 的 根据《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》，规范本中心新型冠状病毒感染 根据《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》，规范本中心新型冠状病毒感染 的肺炎的检测方法。 的肺炎的检测方法。 2. 适用范围 2. 适用范围 体外定性检测新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要进 体外定性检测新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要进 行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者的口咽拭子、鼻咽拭子和痰液样本检测。 行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者的口咽拭子、鼻咽拭子和痰液样本检测。 3. 职 责 3. 职 责 3.1 检测人员：负责按照本检测细则对被检样品进行检测； 3.1 检测人员：负责按照本检测细则对被检样品进行检测； 3.2 复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核； 3.2 复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核； 3.3 科室负责人：负责对科室综合管理和检测报告的签发。 3.3 科室负责人：负责对科室综合管理和检测报告的签发。 4. 检测依据 4. 检测依据 《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》 《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》 5. 操作程序 5. 操作程序 5.1实验前准备 5.1实验前准备 5.1.1检测人员进入污染区前，必须穿好一次性防护服、一次性帽子、N95 口罩、双层 5.1.1检测人员进入污染区前，必须穿好一次性防护服、一次性帽子、N95 口罩、双层 手套、一次性靴套、护目镜、防护面屏不得将与实验无关物品带入实验室。 手套、一次性靴套、护目镜、防护面屏不得将与实验无关物品带入实验室。 5.1.2调节室温至20-25℃，湿度20-80%。 5.1.2调节室温至20-25℃，湿度20-80%。 5.1.3检测试剂在室温平衡半小时;并检查试剂是否在有效期内。 5.1.3检测试剂在室温平衡半小时;并检查试剂是否在有效期内。 5.1.4检查仪器是否正常，做好检测前准备工作。 5.1.4检查仪器是否正常，做好检测前准备工作。 5.1.5开启实验室污染区生物安全柜 5.1.5开启实验室污染区生物安全柜 5.2实验方法见试剂说明书 5.2实验方法见试剂说明书 【检验方法】 【检验方法】 5.2.1试剂准备（试剂准备区） 5.2.1试剂准备（试剂准备区） 从试剂盒中取出核酸扩增反应液、酶混合液、ORF1ab/N 反应液，室温融化，充分 从试剂盒中取出核酸扩增反应液、酶混合液、ORF1ab/N 反应液，室温融化，充分 振荡混匀后瞬间离心。 振荡混匀后瞬间离心。 计算试剂使用份数 N （N=样本数+1管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反 计算试剂使用份数 N （N=样本数+1管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反 μ μ 应体系，加入一适当体积离心管中，充分振荡混匀后瞬间离心，按 20 L 分装至 PCR 应体系，加入一适当体积离心管中，充分振荡混匀后瞬间离心，按 20 L 分装至 PCR 反应管中，并转移至样本处理区。 反应管中，并转移至样本处理区。 μ μ 组分名称 加入体积（ L）/人份 组分名称 加入体积（ L）/人份 核酸扩增反应液 12 核酸扩增反应液 12 酶混合液 4 酶混合液 4 ORF1ab/N 反应液