大规模动物细胞培养的问题及对策.docxVIP

大规模动物细胞培养 动物细胞培养开始于本世纪初，到 1962 年规模开始扩大，发展至今已成为 生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法， 利用动物细胞培养生产具有重要 医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等， 已成为医药生物高技术产业的重要部 分。由于动物细胞体外培养的生物学特性、 相关产品结构的复杂性和质量以及一 致性要求，动物细胞大规模培养技术仍难于满足具有重要医用价值生物制品的规 模生产的需求， 迫切需要进一步研究和发展细胞培养工艺。 目前，世界众多研究 领域集中在优化细胞培养环境、 改变细胞特性、 提高产品的产率并保证其质量和 一致性上。 细胞培养环境 细胞培养环境中抑制因素的积聚是提高细胞密度的主要限制因素。 体外动物 细胞培养中氨离子的积累是抑制细胞生长的主要因素之一。氨的积聚使细胞内 UDP氨基己糖(UDP-N-乙酰葡糖胺和UDP-N-乙酰半乳糖胺)增加，影响细胞的生 长及蛋白的糖基化过程。氨抑制 Gln 代谢途径，使 Asp 和 Glu 消耗增加。细胞 消耗 Asp 增加，可能是细胞线粒体膜上苹果酸－天冬氨酸泵转运 NADH 加快， 使细胞维持糖酵解途径的需要。 Asp 消耗增加可能会从 Gln 代谢多经天冬氨酸转 氨酶途径而不是丙氨酸转氨酶或谷氨酸脱氢酶途径得以补偿。氨来源于两方面： 一是直接来源于培养基， 一是细胞代谢所产生。 但两者都涉及谷氨酰胺， 因此需 要防