TOF_QTOF常见问题与解答.pdfVIP

TOF QTOF QA： 1. 什么是自动调谐（AutoTune）？多长时间进行一次自动调谐？如何判断 TOF 需要自动调谐？ 简单的说，自动调谐(Autotune)是指仪按照预先编好的软件程序，利用调谐液（Calibrant） 里的离子做标准，对仪器的灵敏度及质量检测精度进行自动优化及校准的过程。调谐时仪器 做的事其实就是优化各级离子透镜的电压以确保离子能够顺利的最大限度的从离子源到达检 测器。通常，对于 TOF/QTOF 来说，仪器的调谐后的相关参数在相当长的时间内(例如 3 个月 或以上)会维持稳定，不会随开关机、或维护与否而发生大的改变，因此我们建议在必要时如 仪器的灵敏度有问题时才进行 Autotune，这个时候仪器会自动的调整仪器的增益以获得最佳 的响应。如果在停机，更换气体，日常维护等之后，在仪器重新开机达到正常的真空度后， 调谐的参数很少会发生改变，因此通常不必做 Autotune。我们建议用户每天或者做样之前进 行一次 Calibration 即可，保证仪器有最佳的精度。如果 Calibration 的结果绝大多数是 pass，则完全不需要进行 Autotune。所以，在进行 Autotune 之前，先做 Calibration 或者 Checktune，根据它们的结果来决定是否进行 Autotune。建议在做 Autotune 之前先给安捷伦 800 响应中心一个电话，咨询一下，要不要做。 2. 为什么有时 CALIBRATION 时误差很大，怎么办？ Calibration 只校正质量轴的偏差，不改变其他任何参数。可以在任何操作模式下进行。建 议每天运行样品前做一次 Calibration。以确保仪器的测量精度。如果仪器受到了污染， Calibration 的结果会给出较大的误差，因为校正时，在 TOF MASS CALIBRATION标签下有个 Peak Detection Window，缺省值为 1%，即离子检测窗口大小为被测离子质量的 1%，软件在 给出的调谐液里的相关离子的 Peak detection Window 里找到的丰度最大的离子被认为是该 离子，并按照这个结果计算校正值，当仪器污染时，当出现在 Peak detection Window 里的 污染离子丰度值超过调谐液中给出的离子的丰度时，软件会错把污染离子当成是校正的离子， 这时就会得到很大的误差，这时可以把 Peak detection Window 改成 0.1%试试，通常会很有 效果，但最好的办法还是清洗干净仪器的离子源和毛细管。判断是否污染还有一个办法，就 是将 Calibration 结果中误差最大的一个或几个离子在校正离子列表中去掉，然后再做一次 calibration,如果剩下的离子误差都能够在正常范围，就说明确实在误差大的质量范围里有 污染存在，通常 m/z118；322；622附近是最容易污染的。 3. 做 Autotune 需要注意什么问题？如果不能通过怎么办？ a. 首先，进行 Atuotune 必须确保仪器已经完成开机过程，TOF 真空达到 1.5e-6 torr 以下， 最好能达到 9e-7torr 以下，并且调谐液（Calibrant）要大于 30ml，调谐液没有过期或 污染。 b. 请确保仪器是没有污染的，最好先做个离子源的维护以防止杂质离子的干扰，很多事实 表明，在仪器有污染的情况下，盲目的 Autotune 导致了更糟糕的结果。 c. 备份原来的调谐参数，这点很重要，因为万一调谐出了问题，我们还可以恢复我们的调 谐文件。 d. 把 LC 的流量增大至 1ml/min 冲洗喷雾针 5 分钟。 e. 在 Instrument state 的标签里选择 Extended Dynamic Rang(2G)，注意 Autotune 一定要 在这个模式下进行。 安捷伦 HPLC-MS6200/6500 系列液质联用仪现场培训手册  Page