M动物细胞融合与单克隆抗体复习.pdfVIP

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合 一、动物细胞融合 （一）.动物细胞融合概念 又称为细胞杂交。指两 个或多个动物细胞结合形成 一个细胞的过程。 杂交细胞：融合后形成 的具有原 两个或多个细胞 遗传信息的单核细胞，称为 杂交细胞。 为什么灭活的病毒能作为诱导剂？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子 和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 一、动物细胞融合 一、动物细胞融合 （二）.原理： 细胞膜的流动性。 （三）.促进细胞融合方法 物理法：电激、振动、离心等 化学法：聚乙二醇 （PEG） 生物法：灭活的病毒 （最常用） （四）. 动物细胞融合过程 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞 （杂交细胞 ）进行有丝分裂 （动物细胞培养技术） （五）. 结果 产生杂交细胞，即具有原 两个或多个细 胞遗传信息的单核细胞。 （六）. 用途 最重要的用途是制备单克隆抗体。 （七）植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞膜的流动性 原理 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞融合过程 去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理 （离心、振 物理、化学方法 诱导融合方法 动、电激） （同左） 化学 （聚乙二醇） 生物：灭活的病毒 用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体 每一个浆细胞 二、单克隆抗体 体内产生的 二、单克隆抗体 只能产生一种 特异性抗体 特异性抗体 多达百万种 • 人们获得抗体的传统方法是什么? 抗原 刺激 动物体内 浆细胞 抗体 血清 筛选单一浆细胞 不能无限增殖产生大量抗体 • 这种方法的缺点是什么? 产量低、纯度低，制备的抗体特异性差。 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 设计方案： 一个浆细胞只分泌 骨髓瘤细胞能无限增 + 一种特异性抗体 + 殖 单 克 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术