细菌复苏、冻存、培养.pdfVIP

细菌复苏，冻存，培养方法 复苏： 1. 无菌操作台灭菌 30min 后，75%酒精棉球消毒包括手在内的所 有物品 2. 用灭菌接种环蘸取一环菌液放入 3ml LB 培养基中，于 37℃ 150rpm 过夜培养 （2.用接种环蘸取菌液在 LB 琼脂培养基上分 区划线， 37 度培养 16-18 小时） 3. 将过夜菌液重新按照步骤 2 活化一次 （3.在超净台下挑取单个 菌落接种至 1mlLB 液体培养基， 37 度 150rmp 过夜培养） 4. 菌液即可用于实验 冻存： 1. 将活化 2 次后的菌液重新接种于 5mlLB 培养基中，于 37℃ 150rpm 过夜培养； 2. 取 800ul 菌液放入 1.5ml 离心管中，加入灭菌甘油（终浓度为 20-30% ）（1：1）。混匀后，用封口膜封好， -80 度冰箱冻存。 至少冻存 3 管。 培养