基因工程及蛋白质工程 (共53张PPT).pptxVIP

现代生物科技专题; 又称基因拼接技术,或重组DNA技术。 ;基因操作的基本步骤示意图;基因操作的工具;1.基因的剪刀—限制性核酸内切酶（限制酶）;2.基因的针线—DNA连接酶; ①连接的部位：磷酸二酯键 ②结果：两个相同的末端的连接 ③举例：E·coli DNA连接酶 （大肠杆菌中分离，连接黏性末端） T4 DNA连接酶 （T4噬菌体中分离，连接黏性末端和平末端）?? ;①作用：将外源基因送入受体细胞 ②具备的条件： 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具有多个限制酶切点 具有某些标记基因 对受体细胞无害 ③常用运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒??? ;基因工程的“四步曲”;步骤一：目的基因的获取;基因文库: 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 基因组文库: 基因文库中包含了一种生物所有的基因,这种基因文库叫做基因组文库. 部分基因文库（cDNA文库）: cDNA文库中包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库.;文库类型;基因文库中不是直接保管相应基因， 而是保存受体菌，菌中含基因;目的基因的mRNA;2）根据已知的氨基酸序列合成DNA法 ;PCR过程（三次）;;;;;条件;步骤二：基因表达载体的构建;基因表达载体的组成：;步骤二：基因表达载体的构建;①载体与表达载体的区别： 二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少 ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。;1.将目的基因导入植物细胞;表达载体导入农杆菌，再让农杆菌感染植物细胞;目的基因插入到 Ti质粒的T-DNA上;1.将目的基因导入动物细胞;原核生物特点：;CaCl2法：;CaCl2法：;检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 功能活性鉴定 抗性鉴定 ;;基因工程的应用;(2013·新课标Ⅰ，40节选) 材料甲 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型 巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 回答下???问题： (1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用__________法。构建基因表达载体常用的工具酶有__________和____________。在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是__________________________________________________________。;(2014·新课标Ⅱ，40)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。 回答下列问题： (1)理论上，基因组文库含有生物的____________基因；而cDNA文库中 含有生物的________基因。 (2)若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中________出所需的耐旱基因。;(2014·新课标Ⅱ，40)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。 回答下列问题： (3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物 ________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的____________，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的__________是否得到提高。;(2014·新课标Ⅱ，40)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。 回答下列问题： (4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时，则可推测该耐旱基因整合到了________________________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。;(2015·新课标I，40)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。 回答下列问题： (1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的 ，以其作为模板，在的作用下合成 。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。;(2015·新课标I，40)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。 回答下列问题：;(2015·新课标I，40)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。 回答下列问题