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端粒长度检测方法： 实时荧光定量PCR分两部分进行，分别测定端粒和内参基因RPLPO（核糖体大亚基PO蛋白基因）的Ct值，每次反应需要设定标准曲线。端粒（T）重复拷贝数与单拷贝基因（S）的比率，即T/S比率可以得出端粒的相对长度，而T/S比率与端粒长度成正比关系。T/S计算公式如下： T/S= [2CT(telomeres)/2CT(single copy gene)]=2-ΔCT 1基因组DNA的提取 提取人外周血基因组DNA 以试剂盒提取获得人外周血基因组DNA。 2实时荧光定量PCR测定DNA端粒长度 引物序列 端粒 Tel 1：浓度675 nmol/L 序列 5’-GGTTTTTGAGGGTGAGGGTGAGGGTGAGGGTGAGGGT-3’ 端粒 Tel 2：浓度1350 nmol/L 序列5’-TCCCGACTATCCCTATCCCTATCCCTATCCCTATCCCTA-3’ RPLPO基因 hRPLPO1：浓度800 nmol/L 序列5’-CCCATTCTATCATCAACGGGTACAA -3’ RPLPO基因 hRPLPO2：浓度800 nmol/L 序列5’-CAGCAAGTGG-GAAGGTGTAATCC -3’ 标准曲线制作 选取同一血样基因组DNA为标准品，使用等比稀释，稀释系数为2，浓度范围为：0.25-64ng/μl，即可稀释得9个浓