对从中国四川泡菜中分离的乳酸菌进行识别和鉴定.pdfVIP

对 从 中 国 四 川 泡 菜 中 分 离 的 乳 酸 菌 进 行 识 别 和 鉴 定 泡菜是传统的发酵蔬菜产品 , 在中国的四川省很受欢迎。本文研究的目的是通过分析来自四川省 6 个不同地 区的 36 个样品来调查主要物质乳酸菌在泡菜中的多样性 ( 实验室 ) 。这些样品的实验室计数的记录是从 3.90 到 8.40cfuml-1 。使用 MRS琼脂培养基，从这些样本中获得总共有 185 个假定的革兰氏阳性实验室和过氧化 氢酶缺乏的属性 , 这些菌株被发现在物种水平生理测试上， 16srRNA 基因测序和 PCR扩增鉴定。结果显示 , 所 有的所分离的乳酸菌都准确地确定为肠球菌 thailandicus(2 株 ) 、乳杆菌 (16 株 ),l. 短(24 株),l.paracasei(9 株 ),l. 杆菌 (81 株),l.pentosus(38 株),l.sakei(8 株 ),l.spicheri(1 株 ) 、乳酸明串珠 菌(1 株 ) 和片球菌属 ethanolidu-rans(5 株 ) 。四川泡菜的主要实验室 l. 杆菌， 它是从大多数样本中分离的。 结果还表明 , 来自四川省不同地区的实验室物种复杂成分 , 和这样一个资源丰富的实验室菌株为进一步的研 究提供原始数据涉及益生菌菌株的选择。 关键词：识别 ; 乳酸菌 ; 泡菜 ;16srRNA 基因序列 介绍： 泡菜 , 一种有点咸有点酸的发酵的蔬菜 , 四川人已经吃了数百年。 由于制作简单和独特的风味 , 泡菜很受欢迎， 经常作为四川主菜的配菜或者开胃菜。自制的泡菜都是基于高度依赖于原材料生存的微生物存在而自然发 酵, 。对于所需酸度和风味水平的不同 , 泡菜的制备过程是很重要的。通常许多蔬菜 , 如白菜、芹菜、辣椒和 萝卜都是沉浸在 6-8%的盐溶液而红辣椒 , 葱和大蒜在一个特殊的罐子里夏天至少 5-7 天( 约 20-27 °C)冬天长 达 12-16 天( 约° C)8-15 日。 采收的蔬菜表面上有各种各样的微生物， 虽然蔬菜表面乳酸菌的数量 ( 实验室 ) 通常是相对比较低的， 在最后 的发酵阶段，由于实验室厌氧和低盐的条件使其快速增长 (Hanetal.,2007) 。刚采摘的蔬菜表面所附着的微 生物主要是革兰氏阴性腐生菌 (Seoetal.,2010) 。在自然发酵过程的初始阶段，实验室的数量是低的，使得 硝酸盐还原细菌快速增长 (Yanetal.,2008) 。在中间阶段 , 肠杆菌科 ( 大肠杆菌、 肠杆菌属等 ) 和芽孢杆菌是低 盐和厌氧条件下，他们逐渐死亡。同时 , 实验室菌种快速增殖 , 产生酸 , 在厌氧条件下成为优势种和抑制肠杆 菌科和芽孢杆菌的生长。发酵结束时 , 大量的实验室将会控制微生物，使泡菜发酵保持稳定 (Karasuetal.,2010;PanagouandKatsaboxakis,2006) 。因此， 它是值得实验室从泡菜中进行分离菌体使泡菜 能都进行工业化生产。 这项研究报告是对来自中国四川省不同地区的 36 个样品品种进行分离和鉴定。 185 个菌株通过表型特征进 行初步鉴定，并且进一步通过 16sRNA测序和 PCR扩增技术进行测定。 材料和方法 泡菜样品的收集， 36 个样本的泡菜收集来自四川省的六个不同的地区，泡菜在抽样时的温度范围从 8.7 °C 到 16.4 °C;平均温度为 13.2 °C( 表 1) ，在采样现场泡菜汁的 pH 值测定应用校准便携式酸碱计 ( 美国 ExtechpH100 ），室温下， 泡菜汁的样品收集时间为 15 分钟 , 在冰上进行 2-5h 运输和样品到达实验室后立即 进行了微生物分析。 计数和隔离的实验室 稀释是 1 毫升的泡菜汁加 9 毫升生理盐水 (0.9% 氯化钠 ) 。进一步连续稀释 10 倍，范围是 10-5 到 10-9 ，在 实验室进行处