净化工作台洁净度的测定作业指导说明书.docVIP

净化工作台洁净度测定作业指导书 1 编制目标 为规范和指导净化工作台洁净度测定，制订本作业指导书。 2 适用范围 本作业指导书适适用于净化工作台洁净度测定。 3 制订依据 GB/T 16294.1-1996《医药工业洁净室（区）沉降菌测试方法》。 4 检验原理 经过自然沉降原理搜集在空气中生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜条件下让其繁殖到可见菌落进行计数，以平板培养皿中菌落数来判定洁净环境内活微生物数，并以此来评定洁净室（区）洁净度。 5 检验人员 检验人员应含有大专以上相关专业学历，并经政府相关管理部门培训考评，持证上岗。 6 检验仪器及设备 6.1 LDZX-40KBs立体压力蒸汽灭菌器 6.2 GRP-9050隔水恒温培养箱 6.3 DGG-9053A电热恒温鼓风干燥箱 6.4 电炉 6.5 架盘天平 7 试剂和材料 7.1 营养琼脂培养基 称取营养琼脂粉末38g分装于盛有1000ml蒸馏水玻璃容器中，经121℃灭菌20min,倾注约15ml于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板，存放于冷暗处备用。 7.2 放大镜 7.3 灭菌平皿（直径9cm） 8 检验程序 8.1采样方法:将已制备好培养皿按要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。 8.2培养:全部采样结束后，将培养倒置于恒温培养箱中培养l,在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于48h。可每批选定3只培养皿作对照培养。 8.3菌落计数:用肉眼直接计数，标识或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检验，不要遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重合，可分辨时仍以2 个或2个以上菌落计数。 8.4采样点数目、其部署及培养皿数 沉降法最少采样点数可按表1确定。 表1 最少采样点数目 面 积 m2 洁 净 度 级 别 100 10 000 100 000 10 2～3 2 2 ≥～20 4 2 2 ≥～40 8 2 2 ≥40～100 16 4 2 ≥100～200 40 10 3 ≥200～400 80 20 6 ≥400～1000 160 40 13 ≥1 000～2 000 400 100 32 800 200 63 注：表中面积，对于单向流洁净室，指是送风面面积，对非单向流洁净室是指房间面积。 在满足最少测点数同时，还宜满足最少培养皿数，见表2。 表2 最少培养皿数 洁净度等级 所需?90mm培养皿数（以沉降0.5h 计） 100 4 2 2 10 000 100 000 9 测定范围和检验结果报出 9.1 结果计算 9.1.1 用计数方法得出各个培养皿菌落数。 nM n M1+M2+???Mn 平均菌落数M= ……………（1） 式中：M——平均菌落数； M1——1号培养皿菌落数； M2——2号培养皿菌落数； Mn——n号培养皿菌落数； n——培养皿总数。 9.2 结果评定 用平均菌落数判定洁净室（区）空气中微生物。洁净室（区）内平均菌落数必需低于所选定评定标准（净化工作台100级即沉降菌数≤1CFU/皿·半小时）。若某洁净室（区）内平均菌落数超出评定标准，则必需对此区域优异行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 10 注意事项 10.1 测试用具要作灭菌处理，以确保测试可靠性、正确性。 10.2 对培养基、培养条件及其它参数作具体统计。 10.3 因为细菌种类繁多，差异甚大，计数时通常见透射光于培养皿后面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并须注意细菌菌落和培养基沉定物区分，必需时用显微镜判别。 10.4 采样前应仔细检验每个培养皿质量，如发觉变质、破损或污染应剔除。 10.5 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）已经过消毒。 10.6 测试状态有静态和动态两种，测试状态选择必需符合实际使用要求，并在汇报中注明测试状态。 10.7 测试人员必需穿戴符合环境洁净度等级工作服。 10.8 对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。对非单向流，如10 000级、100 000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。