人用重组dna制品质量控制技术指导原则.pdfVIP

人用重组 DNA制品质量控制技术指导原则 一、引言 由于分子遗传学、核酸化学及重组 DNA（rDNA）技术的迅速发展，现已 能够确定和获得许多天然活性蛋白的编码基因， 将其插入表达载体或引入某种宿 主细胞后，能有效地表达该基因产物，再经分离、纯化和检定，可得到用于预防 和治疗某些人类疾病的制品，诸如现有的乙型肝炎疫苗、胰岛素、生长激素、干 扰素等。 用不同于常规方法的 rDNA技术生产的制品， 是近年来出现的新产品， 评 价其安全性和有效性亦不同于常规方法。这一领域中的知识和技术还在不断发 展，为了有利于这类制品在我国的研究和发展，并为这类制品的审评提供依据， 有必要制定一个原则性指导文件，以保证在人群中试验或应用时安全有效。 本 “人用重组 DNA制品质量控制技术指导原则” （以下简称《指导原则》） 不可能面面俱到， 可能有许多专门技术问题会出现， 对于这类问题或某一特定制 品，则应视具体问题具体研究决定。本《指导原则》亦将随科学技术发展和经验 积累而逐步完善。 二、总则 （一）本《指导原则》适用于 rDNA技术生产并在人体内应用的蛋白质、 肽类制品。 （二）凡属与一般生物制品有关的质量控制，均按现行版《中国药典》 有关规定执行。 有关生产设施的要求应参照国家药品监督管理局 《药品生产质量 管理规范》执行。 三、质量控制要求 （一）原材料的控制 1 ．表达载体和宿主细胞 应提供有关表达载体详细资料，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载 体的构建、 结构和遗传特性。 应说明载体组成各部分的来源和功能， 如复制子和 启动子来源，或抗生素抗性标志物。提供至少包括构建中所用位点的酶切图谱。 应提供宿主细胞的资料，包括细胞株（系）名称、来源、传代历史、检定结果及 1 基本生物学特性等。 应详细说明载体引入宿主细胞的方法及载体在宿主细胞内的状态 （是否整合 到染色体内）及拷贝数。应提供宿主和载体结合后的遗传稳定性资料。 2 ．克隆基因的序列 应提供插入基因和表达载体两侧端控制区的核苷酸序列。所有与表达有 关的序列均应详细叙述。 3 ．表达 应详细叙述在生产过程中，启动和控制克隆基因在宿主细胞中的表达所 采用的方法及表达水平。 4 ．原辅料 原辅料应按照国家药品监督管理局有关规定执行。动物源性原料的使用 应提供来源及质控检测资料；发酵用培养基不能添加 β内酰胺类抗生素。 （二）生产的控制 1 ．主细胞库（ MASTERCELLBANK） rDNA 制品的生产应采用种子批（ SEEDLOT）系统。从已建立的主细胞库 中，再进一步建立生产细胞库（ WCB）。 含表达载体的宿主细胞应经过克隆而建立主细胞库。在此过程中，在同 一实验室工作区内，不得同时操作两种不同细胞（菌种）；一个工作人员亦不得 同时操作两种不同细胞或菌种。 应详细记述种子材料的来源、方式、保存及预计使用寿命。应提供在保 存和复苏条件下宿主载体表达系统的稳定性证据。 采用新的种子批时， 应重新作 全面检定。 真核细胞用于生产时， 细胞的鉴别标志， 如特异性同功酶或免疫学或遗传学特征， 对鉴别所建立的种子是有用的。 有关所用传代细胞的致癌性应有详细报告。 如采 用微生物培养物为种子，则应叙述其特异表型特征。 一般情况下，在原始种子阶段应确证克隆基因的