薄层色谱TLC(点板)的基本原理.pptx

薄层色谱(点板)的基本原理 ★ ★ 薄 层 色 谱 ， 或 称 薄 层 层 析 (thin — 1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为 固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分 离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速 分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱 及其他多种物质的特别有效的层析方法，从 50 年代发 展起来至今，仍被广泛采用。 (一)基本原理 薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板， 也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行 展开。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分 为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄 层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛 凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相 的薄层吸附层析。 吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成 表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶 质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体 与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能 发生吸附现象。;物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表 面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力 不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称 的，其力场互相抵消。而处于固体表面的分子所受的 力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用 力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分 子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响， 就会被吸引而停留下来。吸附过程是可逆的，被吸附 物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附 于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离 开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平 衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸 附与解吸的动态平衡过程。 例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力 与分配系数的不同，使混合物得以分离。当溶剂沿着 吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时 发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各 组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸 附能力的差异，最???将混合物分离成一系列斑点。如 作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根 据这些已知化合物的 Rf 值（后面介绍 Rf 值）对各斑 点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法;3