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植物组织中淀粉含量的测定
2007-01-12 08:55
Ⅰ 蒽酮硫酸法
一、原理
淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄
糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用蒽酮
试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定。
二、实验材料、试剂与仪器设备
(一)实验材料
任何植物材料。
(二)试剂
浓硫酸(比重 1.84 )。
9.2mol/L HClO 4 。
2%蒽酮试剂,同实验 24 。
(三)仪器设备
电子天平,容量瓶: 100 mL 4 个、 50 mL 2 个,漏斗,小试管若干支,电
炉,刻度吸管 0.5mL 1 支、 2.0 mL 3 支、 5 mL 4 支,分光光度计,记号
笔。
三、实验步骤
1. 标准曲线制作
取小试管 11 支从 0~10 编号,按表 24-3 加入溶液和蒸馏水。
以下步骤按苯酚法或蒽酮法均可,见方法一或方法二,绘制相应的
标准曲线。
表 24-3 各试管加入标准液和蒸馏水量
管 号
0
1~2
3~4
5~6
7~8
9~10
淀粉标准液(ml)
0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
蒸 馏 水(ml)
2.0
1.6
1.2
0.8
0.4
0
淀粉含量(mg)
0
40
80
120
160
200
2. 品提取 称取 50 ~ 100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干 品,置于
15 mL 刻度试管中,加入 6 ~ 7 mL 80 %乙醇,在 80 ℃水浴中提取
30 min ,取出离心( 3000 rpm ) 5 min ,收集上清液。重复提取两次(各
10 min )同 离心,收集三次上清液合并于烧杯,置于 85 ℃恒温水浴,
使乙醇蒸发至 2 ~ 3 mL ,转移至 50 mL 容量瓶,以蒸馏水定容,供可溶
性糖的测定。
向沉淀中加蒸馏水 3 m
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