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植物组织中淀粉含量的测定 2007-01-12 08:55 Ⅰ 蒽酮硫酸法 一、原理 淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄 糖,然后在浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用蒽酮 试剂与糠醛化合物的显色反应,即可进行比色测定。 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 任何植物材料。 (二)试剂 浓硫酸(比重 1.84 )。 9.2mol/L HClO 4 。 2%蒽酮试剂,同实验 24 。 (三)仪器设备 电子天平,容量瓶: 100 mL 4 个、 50 mL 2 个,漏斗,小试管若干支,电 炉,刻度吸管 0.5mL 1 支、 2.0 mL 3 支、 5 mL 4 支,分光光度计,记号 笔。 三、实验步骤 1. 标准曲线制作 取小试管 11 支从 0~10 编号,按表 24-3 加入溶液和蒸馏水。 以下步骤按苯酚法或蒽酮法均可,见方法一或方法二,绘制相应的 标准曲线。 表 24-3 各试管加入标准液和蒸馏水量 管 号 0 1~2 3~4 5~6 7~8 9~10 淀粉标准液(ml) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 蒸 馏 水(ml) 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0 淀粉含量(mg) 0 40 80 120 160 200 2. 品提取 称取 50 ~ 100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干 品,置于 15 mL 刻度试管中,加入 6 ~ 7 mL 80 %乙醇,在 80 ℃水浴中提取 30 min ,取出离心( 3000 rpm ) 5 min ,收集上清液。重复提取两次(各 10 min )同 离心,收集三次上清液合并于烧杯,置于 85 ℃恒温水浴, 使乙醇蒸发至 2 ~ 3 mL ,转移至 50 mL 容量瓶,以蒸馏水定容,供可溶 性糖的测定。 向沉淀中加蒸馏水 3 m

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