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自由基清除剂及其加工技术 一、自由基的概念及其对人体的影响 定义：自由基是指任何包含一个或多个未成对电子并能独立存在的原子或基团 种类:包括氢自由基（H·）、超氧阴离子自由基（O2 -· ）、羟自由基（·OH）、烷氧基（R·）、氢过氧基（HO2 -）、单线态氧（1O2，属于活性氧，是普通氧3O2的激发态） 。 自由基的利与弊 :（PPT的图） 第一节 黄酮类化合物 一、概述 黄酮类化合物是优良的活性氧清除剂和脂质抗氧化剂，它是广泛存在于自然界的一大类化合物，多具有艳丽的色泽，是许多中草药中主要活性成分之一。 生理功能： 1 清除自由基 机理：与超氧阴离子反应阻止自由基反应的引发，与铁离子络合阻止羟基自由基的生成，与脂质过氧化基反应阻止脂质过氧化过程。 2 调节免疫功能 增强巨噬细胞吞噬能力和自然杀伤细胞活性； 增加抗体产量，调节体液免疫功能和细胞免疫功能； 通过血脑屏障吸收活性自由基，起抗衰老作用。 3 保护心血管系统 能影响血管的脆性和渗透性，改善血液循环状态，增加冠脉流量； 选择性地与血管壁上的血栓结合，起抗血栓形成作用； 防治血管老化和脑血管供血不足作用。 4 抗癌作用 致癌物(苯、苯并芘、亚硝基化合物)，是由惰性物经生物转化成的高活性物质，能破坏细胞结构，引发疾病，转化中产生一些自由基中间物，进一步形成活性很强的羟基自由基和单线态氧，引发癌症。 5 抗炎作用 黄酮类化合物具有抗病原微生物、抗炎症、抗感染作用。 6 保护肝脏作用 能促进组织再生，修复脏器官的病变组损伤。临床上用以治疗急、慢性肝炎，肝硬化以及多种肝损伤等。 7 调节分泌功能 国外流行病因学研究证明，人的乳腺癌、结肠癌和大肠癌的发病率远低于西方人，其重要原因是人的食物中含有大量的植物雌激素。 二、黄酮类化合物的制备工艺 （一）原料 1 豆类：大豆等; 2 水果类：山楂、葡萄柚、蔷薇果、柑桔、柠檬等。 3 蔬菜类：花茎甘蓝、洋葱、番茄 4 中草药类：杜仲、黄芩、红花、金银花、菊花、甘草、皮、射干、地锦、淫羊藿、蒲黄等; （二）减压蒸馏法 黄酮类化合物在水中有一定溶解度，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂。 用热水浸提出多糖、脂类及黄酮类化合物等可溶性成分，再用有机物溶剂进一步提纯。 （三）树脂柱纯化法 离子交换树脂是一种不溶性高分子物质，对溶液中的离子具有选择吸附能力; 选择适宜的树脂，极性相近的黄酮类被吸附在树脂柱，得到富集、纯化，然后用洗脱剂洗脱出来。 （四）碱提取酸沉淀法 黄酮苷类不溶于酸性水，易溶于碱性水; 采用碱液提取，再在提取液中加酸，黄酮苷类即可沉淀析出。 简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取。 （五）超声波提取 破坏植物细胞壁，使细胞有效成分大量溶于有机溶剂，提高提取效率。 （六）超临界CO2提取 在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。当然，对应各压力围所得到的萃取物不可能是单一的，但可以控制条件得到最佳比例的混合成分，然后借助减压、升温的方法使超临界流体变成普通气体，被萃取物质则完全或基本析出，从而达到分离提纯的目的，所以超临界流体萃取过程是由萃取和分离组合而成的。 三、黄酮类化合物的应用 黄酮类化合物的两种利用方式： 1 植物提取液直接制取功能食品。 2 提取液经浓缩、分离纯化、干燥，制取高纯度的黄酮化合物，用于食品抗氧化剂和制造功能食品。 第二节 超氧化物歧化酶 一、概述 1969年Mccord和Fridivich首次从牛血红细胞中发现并分离出超氧化物歧化酶。超氧化物歧化酶可以专一清除超氧自由基（O2 -· ）。 生理功能： 1 延缓由于自由基侵害引起的衰老现象 2 治疗由自由基损伤而诱发的疾病 3 消除肌肉疲劳 4 提高人体的抵抗力 二、超氧化物歧化酶的制备工艺 （二）沉淀法制备超氧化物歧化酶原理 1 SOD热稳定性好，温度低于80℃，短时间热处理酶活力损失不大，一般杂蛋白在高于55℃易变性沉淀。 2 酶蛋白在等电点时，溶液中的静电荷为零，酶蛋白的溶解度最小而沉淀下来。 3 在超氧化物歧化酶粗酶溶液中加入一些弱极性有机溶剂（丙酮），改变溶液的介电常数，使不同种类的蛋白质的溶解度产生不同程度的下降，把超氧化物歧化酶和其他的杂蛋白分开。 （三）离子交换层析法 离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行。 SOD等电点在4~6之间，pH7.0时带负电，能被阴离子交