常见层析法整理.pptxVIP

层析技术的应用 一、层析技术的原理和分类 （一）层析技术的原理 层析法是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家 M.Tswett 发现并使用这一技 术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及 其它学科领域有效的分离分析工具之一。 层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成： 一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物 质，如水和各种溶媒。当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质 存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比） 不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份， 随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。反之，与固定相相互作用越强的组份，向 前移动速度越慢。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目 的。 （二）层析法分类见表 16-5～7 （三）层析法的特点与应用 表 16-5 按两相所处状态分类 ;2;3;4;;6;7;8; 如果被纯化的物质是氨基酸类的分子，则分子上的净电荷取决于氨基酸的等电点和溶液的 pH 值，所以当溶液的