SDS电泳溶液的配置.docxVIP

SDS电泳溶液的配置 1、 5×Tris- 甘氨酸电泳缓冲液 试 剂 浓 度 称 重 备 注 Tris 0.125 M 15.1g 加入 800 ml 的双蒸水溶解， 甘氨酸（ Glycine ） 1.25 M 94g SDS 0.5 %（W/V ） 5g 定容至 1 L ，室温保存 2、染色液 试 剂 浓 度 称 重 备 注 乙醇 25 %（V/V ） 250 mL 双蒸水溶解，定容至 1 L，滤纸 8%（V/V ） 80 mL 冰醋酸 0.25 % 2.5g 过滤后， 室温保存 考马斯亮蓝 3、脱色液 试 剂 浓 度 称 重 备 注 乙醇 25 %（V/V ） 250 mL 定容至 1 L ，室温保存 8%（V/V ） 80 mL 冰醋酸 4、 30% 丙烯酰胺混合液（ 29： 1） 试 剂 浓 度 称 重 备 注 丙烯酰胺 29 % （W/V ） 29g 加热溶于 60 ml 双蒸水中，定容至 甲叉丙烯酰胺 1% （W/V） 1g 100ml ，滤纸过滤， 棕色瓶室温保存 5、10 % 过硫酸铵（ APS ） 试 剂 浓 度 称 重 备 注 过硫酸铵 10 % （W/V ） 1 g 溶解 10 ml 双蒸水， 4℃避光保存 6、 10 % SDS （十二烷基硫酸钠 ） 试 剂 浓 度 称 重 备 注 SDS 10 % （W/V ） 10 g 定容 100ml 双蒸水，滤纸过滤， 室温保存 7、 1mol/L HCl 试 剂 HCl  浓 度 1mol/L  称 重 15 ml  备 注 加水稀释至  180ml 8、分离胶缓冲液（ pH8.9 ）－ 1.5mol/L Tris － HCl 试 剂 浓 度 称 重 备 注 Tris 1.5mol/L 18.18 g 调 pH8.9 ，定容至 100ml ， 1mol/L HCl 48%V/V） 48 ml 滤纸过滤， 室温保存 注：或先加水至 80ml, 用浓 HCl 调 pH ，再定容至 100ml. 9、浓缩胶缓冲液（ pH6.8 ）－ 0.5mol/L Tris － HCl 试 剂 浓 度 称 重 备 注 Tris 0.5mol/L 6.06 g 调 pH6.8 ，定容至 100ml ， 1mol/L HCl 48%V/V） 48 ml 滤纸过滤， 室温保存 注：或先加水至 80ml, 用浓 HCl 调 pH ，再定容至 100ml. 10、 5×上样缓冲液 试 剂 浓 度 称 重 备 注 0.5 mol/L Tris － 6 %（V/V ） 0.6 mL HCl （ pH6.8 ） 溶解后分装 1ml/ 管，使用前加入 水饱和溴酚兰 2 %（V/V ） 0.2 mL 甘油 50% （V/V ） 5 ml 30 微升 2-巯基乙醇， 4℃保存 10% SDS 20 %（V/V ） 2 ml 双蒸水 2.2 ml