2021年岗梅水提取物抗炎分析论文.docVIP

2021年岗梅水提取物抗炎分析论文 1材料与方法 1.1药物及试剂岗梅水提取物采用水煎法自制，方法为：取适量岗梅，每次用8倍量水煎煮1h，共2次，合并2次水煎煮液，浓缩，备用；阿司匹林片：河北石家庄制药集团生产，批号：041114；乌拉坦：国药集团化学试剂有限公司生产，批号：E60521；二甲苯：广东光华化学厂有限公司生产，批号角叉菜胶购自美国Sigma公司,批号：59C-0328；青霉素和链霉素混合液（每毫升含800U青霉素和650U链霉素）。 1.2动物昆明种小鼠，雄性，体质量20～24g，SPF级，由第一军医大学实验动物中心提供，动物合格证号：2004A063号；SD大鼠，雄性，体质量150～180g，清洁级标准，由中山大学实验动物中心提供，动物合格证号：粤检证字2003A070。 1.3仪器大鼠足跖容积测定装置，参照文献［2］方法定制。 1.4方法 1.4.1对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响［2］取昆明种小鼠60只，随机分为正常对照组、模型对照组、岗梅水提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物（阿司匹林）组，共6组，每组10只，实验前小鼠禁食不禁水12h，然后各组小鼠按0.1mL/10g体质量灌胃给药，1次/d，共7d，其中正常对照组和模型对照组给等体积蒸馏水。末次给药后30min，除正常对照组外，其余各组小鼠于右耳正反两面涂上二甲苯50μL致炎，致炎1h后脱颈椎处死动物，用直径9mm打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平上称重，以两耳片重差值为炎症肿胀度。 1.4.2对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀及炎症组织中PGE2（前列腺素E2）的影响［2］取SD大鼠50只，随机分为空白对照组、岗梅水提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物（阿司匹林）组，共5组，每组10只。实验前大鼠禁食不禁水12h，然后各组大鼠按1mL/100g体质量灌胃给药，1次/d，共7d，其中空白对照组给等体积蒸馏水。末次给药后1h，先按容积测定方法测量各鼠右踝关节以下容积，然后于各鼠右后足跖皮下注射ρ=1%角叉菜胶0.1mL致炎，分别于致炎后1h、2h、3h、4h时，按原法测量右踝关节以下容积。测完后，颈椎脱臼处死大鼠,于踝关节上0.5cm处剪下炎性肿胀足称重,将以上剪下的致炎足剥皮,剪碎放入5mL生理盐水中浸泡1h后,离心足浸出液,取上清液0.1mL,加0.5mol·L-1KOH-甲醇液2mL,在50℃下异构化20min,用甲醇稀释至5mL,于波长278nm处测定吸光度(A)值,A值的大小反应PGE2的含量。 1.4.3对大鼠棉球肉芽肿的影响［3］取SD大鼠50只，每只大鼠按1g/kg体质量腹腔注射乌拉坦进行麻醉，在各鼠的左右蹊部用碘酒消毒，75%（φ）乙醇脱碘后，各切开1cm长小口，用眼科镊子将已称重为30mg的灭菌脱脂棉球（直径6.5～8.5mm）一个植入皮下，每个棉球加青霉素和链霉素混合液0.3mL，以防感染，随即缝合皮肤。将所有大鼠随机分为空白对照组、岗梅水提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物（阿司匹林）组，共5组，每组10只，实验前大鼠禁食不禁水12h，术后2h开始按1mL/100g体质量灌胃给药，其中空白对照组给等体积蒸馏水，1次/d，共7d。在第8天杀死动物，打开原切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剥出周围已包裹肉芽组织的棉球，剔除脂肪组织，在60℃烘箱放置12h后称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重。 1.4.4对醋酸致小鼠毛细血管通透性增高的影响［3］取昆明种小鼠50只，随机分为空白对照组、岗梅水提取物低、中、高剂量组、阳性对照药物（阿司匹林）组，共5组，每组10只，实验前小鼠禁食不禁水12h，然后各组小鼠按0.1mL/10g体质量灌胃给药，1次/d，共7d，其中空白对照组给等体积蒸馏水。末次给药后1h，各组小鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1mL/10g体质量，随即ip0.6%（φ）醋酸0.1mL/10g体质量，20min后,断头放血处死小鼠，腹腔注射6mL生理盐水，轻揉腹部,收集腹腔洗出液，1000r/min离心5min,取上清液用紫外－可见分光光度计于590nm处测吸光度值(A值)。 1.5统计学处理实验数据以±s表示，采用SPSS统计软件进行统计学处理,以P＜0.05为差异有显著性。 2结果 2.1岗梅水提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响岗梅水提取物中、高剂量组的耳重差与模型组比较，差异具有显著性（Plt;0.01），说明岗梅水提取物能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，提示岗梅水提取物对急性炎性肿胀具有抑制作用。见表1。 2.2岗梅水提取物对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀及炎症组织中PGE2含量的影响低、中、高剂量岗梅