第12章非发酵菌.ppt

第十二章 非发酵菌检验 假单胞菌属、不动杆菌属、窄食单胞菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属等 氧化酶试验 (+/-) 葡萄糖O/F（氧化/发酵）试验 动力试验：需氧菌用悬滴法或鞭毛染色法 O/F试验 不发酵菌对葡萄糖的代谢特点是氧化型，产生微量酸 发酵菌发酵糖产生大量酸 常用的糖发酵试验培养基中蛋白胨和糖类的含量比例为2：1 O/F试验中蛋白胨和糖的比例为0.2：1 第二节 假单胞菌属 G-、直或微弯的杆菌，无芽胞、有鞭毛，专性需氧菌，氧化酶(+) 分布广泛，种类繁多，已超过200种 铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等 铜绿假单胞菌 假单胞菌属的代表菌种，俗称绿脓杆菌 广泛分布于自然界水、土壤、空气。存在于正常人体皮肤、呼吸道及肠道，构成人体正常菌群，为条件致病菌 医院感染的主要病原菌之一 临床意义——致病物质： 黏附素（菌毛、非菌毛样黏附素） 荚膜样物质 内毒素 外毒素A.B.C.S 绿脓素 弹性蛋白酶 磷脂酶C 生物学特性 形态结构： G-杆菌，细长且长短不一 有鞭毛——运动活泼 临床分离株常有菌毛 生化反应： 氧化酶（+） 葡萄糖O/F试验——氧化型 不分解乳糖、蔗糖、麦芽糖 枸橼酸盐、精氨酸双水解酶试验（+） 还原硝酸盐且产生N2 吲哚、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶试验（-） KIA - - - - MIU + - +/- 抗原构造与分型： O 抗原、H抗原 O抗原包括两种成分： 脂多糖——型特异性，用于分型 外膜蛋白——具有强免疫原性，属特异性，其抗体对不同血清型细菌感染有保护作用 抵抗力： 较其他无芽胞细菌强，对干燥及紫外线的抵抗力较强。在潮湿的环境中能长期生存 对多种抗生素不敏感 耐药机制：细胞外膜对药物的通透性低 产生破坏抗生素的酶类 外膜存在独特的药物主动外排系统 细菌生物被膜形成 微生物学检验 标本采集： 根据病情采集相应标本，如血液、CSF、胸腹水、尿液、脓液以及分泌物等 医院环境中各种标本 消毒灭菌效果监测的抽检物 标本直接检查： 直接涂片镜检 脓液、分泌物可直接涂片 CSF、胸、腹水可直接涂片或离心后取沉淀物涂片 分离培养： 血液、体液——增菌 脓液、分泌物、尿液——BAP、MAC 无正常菌群存在的标本——BAP 有正常菌群存在的标本或外环境标本——MAC、SS 鉴定： 菌落特征、色素（约10%菌株不产生色素）、生姜气味 氧化酶（+）、葡萄糖O/F-氧化型 动力（+）、4℃不生长42℃生长 精氨酸双水解酶（+） 还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生N2 第四节 不动杆菌属(Acinetobacter) 为一群不发酵糖类、氧化酶和硝酸盐还原试验（-）、无动力的G-杆菌 临床意义 广泛存在于自然界 是人类皮肤、呼吸道、泌尿道的正常菌群 条件致病菌 引起各种感染和医院感染 大多数菌株对多种抗生素天然耐药 鲍曼不动杆菌，对全部氨基青霉素、一代二代头孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药 生物学特性 形态结构： G-杆菌、形态近似球形或球杆状，单个存在或成双排列，酷似奈瑟菌，有时呈短链状排列 G染色不易脱色，易误认为G+菌 多有荚膜，无鞭毛 培养特性： 专性需氧菌、营养要求不高 最适温度35℃，鲍曼不动杆菌42℃能生长 BAP——圆形凸起、灰白色、光滑、边缘整齐的菌落，直径2~3mm，部分菌株呈黏液状，无溶血环（溶血不动杆菌β溶血） 洛菲不动杆菌菌落小，直径为1~1.5mm MAC——无色/粉红色菌落（产生色素） SS——部分菌株生长 微生物学检验 标本采集： 根据病情采集适当标本 涂片镜检： CSF沉淀物及除血液外其他标本均可直接涂片染色镜检，可见G-球菌或球杆菌、常呈双排列，有的存在于吞噬细胞内，易误诊为奈瑟菌 鉴定： 形态染色、动力（-） 氧化酶（-）硝酸盐还原（-） 不发酵葡萄糖 KIA - - - - MIU - - - 生化反应进一步鉴定 鉴别试验： 氧化酶（-）、动力（-）——可与假单胞菌属鉴别 硝酸盐还原（-）、不发酵葡萄糖——可与肠杆菌科鉴别 氧化酶（-）——可与奈瑟菌鉴别 复习要点 不发酵G-杆菌的共同特点 铜绿假单胞菌、不动杆菌的鉴定及鉴别要点 * * 概述: 是指一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、能在普通培养基生长的G-杆菌 存在于外界环境中 条件致病菌 医院内感染常见病原菌之一 O—F培养基：0.2%蛋白胨 、1%糖 指示剂溴麝香草酚蓝 氧化型：开管产酸 闭管不变 发酵型：开管产酸 闭管产酸 产碱型：开管不变 闭管不变 发酵型