血清肌酸激酶ckdgkc推荐方法测定.docx

血清肌酸激酶CKDGK推荐方法测定 1.实验原理 德国临床化学学会(DGKC和国际临床化学学会(IFCC)推荐 的连续监测法。 ADP +磷酸肌酸CK . 肌酸+ ATP 己糖激酶(HK) ATP +葡萄糖 ADP +葡萄糖-6-磷酸 葡萄糖-6-磷酸+NADPdh) 6-磷酸葡萄糖酸 + +NADPH+H NADPH在 340nm处有特异吸收，通过测定NADPH生 成 速率计算出CK活性。 标本： 2.1病人准备：无特殊要求。 2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。 标本存放：稳定性：2?8 C保存稳定7天;15?25 C 保存稳定1天;-20 C保存稳定4周(避光保存)。3天内 的活性损失：2?8 C保存24小时或18?22 C保存1小时 至少损失10%’ 标本运输：常温条件下保存运输。 标本拒收标准：细菌污染的标本。 实验材料 6.1试剂 奥林巴斯CK测定试剂盒（试剂1 +试剂2 ） 试剂准备：试剂为即用式。 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2?8 C ,若 无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不 能继续使用。 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L ）为防腐剂。 不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措 施使用试剂。 6.2校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分 析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 操作步骤 8.1项目基本参数：参见AU2700生化分析仪项目测定参 数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见 AU2700生化分析仪操作规 程.SOP文件 检验结果的判断与分析 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限， 3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参 见室内质控操作规程.SOP文件。 计算方法：以TruCal U 复合校准品CK校准值校准 仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠 的检测结果。不使用校准品进行CK活力检测，可以直接 使用△ A/min均值乘以计算因子得到结果，但是这样所 得结果的可靠性不如使用校准品。计算CK活力的计算因 子见下表：△ A/min X因子 =CK活力[U/L] 计算因子（37 C ） ： 340nm 4127 365nm 4729 12.参考值范围[1]: (U/L ) 成人：女性 24 ?167 男性 24 ?190 334nm 4207 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据 好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 临床意义[1、2]:肌酸激酶（CK）主要由存在于肌肉中 的同工酶（CK-M）和存在于脑中的同工酶（CK-B）组成。 在血清中CK形式为CK-MM CK-MB，CK-BB和巨酶等的二 聚物。在心肌损伤或骨骼肌疾病时可以观测到CK活力的 升高。CK和CK-MB —起检测有助于心肌梗死的诊断和监 视。 操作性能 14.1 线性范围 V 1200U/L 14.2精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方 法，AU2700批内精密度小于3%,总精密度小于3%。用于 分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 批内精密 度 n=20 x (U/L) s (U/L) CV (%) 批间精密 度 n=20 X (U/L) s (U/L) CV (%) 样品1 159 3.18 2.00 样品1 49.5 1.05 2.12 样品2 220 1.54 0.70 样品2 157 1.63 1.04 样品3 508 3.69 0.73 样品3 228 2.31 1.01 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂 盒(x)，同时对71个样品进行CK活力检测，将检测结果 作方法学比较，其 统计结果如下：y=0.98x+0.02 ( U/L)； r=1.000 。 灵敏度：本试剂的检测限为5U/L o 病人结果可报告范围：5-1200U/L o 病危报警值的处理：无。 方法局限性 17.1本法对CK活力的线性上限为1200U/L，当测定值超 过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+10稀释， 重新测定，结果乘以11 o 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度乞1704?imol/L , 胆红素浓度兰684」mol/L ,血红蛋白空2.00g/L ,甘油三酯 浓度乞22.6mmol/L 时没有观察到干扰。 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家 进行维修。 参考文献 Stein W. Creatine kinase (total activi