中国医科大学生物化学6生物氧化.pptVIP

抑制剂 1. NADH氧化呼吸链 2. 琥珀酸氧化呼吸链 NADH氧化呼吸链 FADH2氧化呼吸链 线粒体内重要代谢物氧化的途径 二、氧化磷酸化将氧化呼吸链释能与ADP磷酸化生成ATP偶联 体内ATP生成的方式： 氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation) 底物水平磷酸化 　　　　(substrate level phosphorylation) 氧化磷酸化 　　是由代谢物脱下的氢，经线粒体氧化呼吸链电子传递释放能量，偶联ADP磷酸化生成ATP的过程，又称为偶联磷酸化。它是ATP生成的主要方式。 底物水平磷酸化 　　是与脱氢反应偶联，直接将高能代谢物分子中的能量转移至ADP（或GDP），生成ATP（或GTP）的过程。 （一）氧化磷酸化偶联部位在复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ内 偶联部位即ATP生成的部位。 P/O比值：是指物质氧化时，每消耗1摩尔氧原子所消耗无机磷的摩尔数，即生成ATP的摩尔数。 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值 底 物 呼吸链的组成 P/O比值 ATP生成部位 ?-羟丁酸 NAD+→O2 2.4~2.8 3 琥珀酸 FAD →O2 1.7 2 抗坏血酸 Cyt c→O2 0.88 1 细胞色素C Cyt aa3→O2 0.61~0.68 1 三个偶联部位： ATP ATP ATP ①NADH与CoQ之间； ②CoQ与Cyt c之间； ③Cyt aa3与氧之间。 2. 自由能变化( △G?)：　　大于30.5kJ即可生成1摩尔ATP。　　△G? ＝－nF△E? 部　位 电位差（ △E? ） 自由能变化 （ △G? ） NAD＋ ～CoQ 0.36V －69.5kJ/mol CoQ ～Cyt c 0.19V －36.7kJ/mol Cyt aa3～O2 0.58V －112kJ/mol NADH氧化呼吸链存在3个偶联部位， P/O比值等于2.5，即产生2.5molATP。 琥珀酸氧化呼吸链存在2个偶联部位， P/O比值等于1.5，即产生1.5molATP。 （二） 氧化磷酸化偶联机制是产生跨线粒体内膜的质子梯度 化学渗透假说 　　　　(chemiosmotic hypothesis) 电子经呼吸链传递时，可将质子（H+）从线粒体内膜的基质侧泵到内膜胞浆侧，产生膜内外质子电化学梯度储存能量。当质子顺浓度梯度回流时驱动ADP与Pi生成ATP。 （三） 质子顺梯度回流释放能量被 ATP合酶利用催化ATP合成 ATP合酶即复合体Ⅴ，位于线粒体内膜的基质侧。 ATP合酶 F0：为疏水部分，由a、b2、c9～12亚基组成，是跨线粒体内膜的质子通道。 F1：为亲水部分，由?3?3???亚基复合体和OSCP（寡霉素敏感相关蛋白）、IF1等亚基组成，作用是催化生成ATP。 ATP合酶结构模式图 化学计算估计每生成1分子ATP需3个H＋从线粒体内膜外侧回流进入基质中。 ATP合酶的工作机制 ATP4- F0 F1 胞液侧 基质侧 腺苷酸 转运蛋白 磷酸 转运蛋白 H2PO4- ATP4- 3H+ 3H+ H+ H+ H2PO4- ADP3- ADP3- 　　每分子ATP在线粒体中生成并转运到胞浆需4个H＋回流进入线粒体基质中 NADH氧化呼吸链每传递2H共生成 2.5分子ATP到线粒体外被利用。 FADH2氧化呼吸链每传递2H共生成 1.5分子ATP到线粒体外被利用。 三、氧化磷酸化作用可受某些内外源因素影响 呼吸链抑制剂阻断氧化磷酸化的电子传递过程 解偶联剂破坏电子传递建立的跨膜质子电化学梯度 ATP合酶抑制剂同时抑制电子传递和ATP的生成 （一）有3类氧化磷酸化抑制剂 鱼藤酮 粉蝶霉素A 异戊巴比妥 抗霉素A 粘噻唑菌醇 CO CN－ N3－ 各种呼吸链抑制剂的阻断位点 萎锈灵 不同底物和抑制剂对线粒体氧耗的影响 解偶联蛋白作用机制（棕色脂肪组织线粒体） Ⅲ Ⅰ Ⅱ F0 F1 Ⅳ Cyt c Q 胞液侧 基质侧 解偶联 蛋白 热能 H+ H+ ADP+Pi ATP 寡霉素(oligomycin) 可阻止质子从F0质子通道回流，抑制ATP生成 寡霉素 （二）ADP是调节正常人体氧化磷酸化速率的主要因素 ［ADP］↑，氧化磷酸化↑。 （三）甲状腺激素刺激机体耗氧量和产热同时增加 Na+,K+–ATP酶和解偶联蛋白基因表达均增加。 （四）线粒体DNA突变可影响机体氧化磷酸化功能 四、ATP在能量的生成、利用、转移和储存中起核心作用 高能磷酸键 水解时释放的能量大于21KJ/mol的磷酸酯键，常表示为 ?P。 高能磷酸化合物 含有高能磷酸键的化合物。 化合物