c6流式细胞仪使用说明.pdfVIP

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  • 2021-01-21 发布于天津
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C6 简易使用 开机请遵循开机程序,开机后,请按如下简要操作: 首先开机后,如有需要,请做 质控( QC)详情请见 C6操作手册。 开机程序后,通过 File——NewWorkplace,新建 1 个 workplace 后直接进行实验。 从 A1 到 H12 都是样本数据的存储空间,可以再上面 label 的地方注明样品信息 。 上样: 每个样品上样之前必须将细胞悬起,如有需要,需要过金属网,将细胞过滤分 开,以防止堵塞管路。 每个样品收完数据后, 在一个非数据存储位置内收集, 用 18.2 的超纯水, Fast run 30s, 防止样品之间的污染。洗管路收集到的数据,直接删除即可。 删除数据: 在点击想删除的数据孔后,单击 即可删除数据。 C6 收集的数据范围非常广,其中重要的一个功能就是放大关注的区间,使用 放大镜 的 按钮 ;与其相反的 缩小功能 按钮是 关于流速: 分为 ,可根据需要选择。 关于 Threshold:一般不进行调整,采用系统默认。 新建一种类型的图: 单击软件右侧区域 (直方图) (散点图) (密度 图) 圈门: 这三个是圈门工具,圈完门后,若在其他图中想只显示 gate 中的 events,需要点击该图左上角的 (Gate),在弹出的对话框中,选择需要 的 gate: (从左往右:gate 中,gate 外,两个 gate 交叠),单击 apply 即可。 收取数据:一般根据需要确定收取数量, 常规收取 10000个 events: 设置补偿: 实验中涉及多色,需要调整补偿时,需要在实验前设置好单独染一种颜色 的实验管,收取数据,收取完数据后,点击 ,根据需要点击相应被调 整的补偿通道 ,更改被剪去的 %,直至 “横平竖直 ”达到补偿要求,选 择 Apply to 1 个或者 All samples后,点击 Apply close 即可。 分析比较数据: 点击屏幕上方红色区域中的 ,添加一个新的分 析面板 ,一般常用 ,点击后,在左侧样本区域中,勾选需要分析的 样本 即可。同样,若需要 gate,请参照上文。 打印分析结果: 将想要打印的部分画上对号 ,然后在 File——Print selected Items 即可打印出相关数据。 数据保存: 所有的数据都存储在 “桌面——Lab data—— LiuWL—— 自己名称的文件夹 中”。 数据导出: 在保存完 C6 格式的数据后,可以导出用 FlowJo 分析, “File ——export all samples toThird party ,…”系统默认保存到桌面, 务必将桌面上的文件拷贝完毕后删除。

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