陕西圈养大熊猫常见病毒病检测与防治研究.pdfVIP

摘 要 摘要 秦岭大熊猫是大熊猫的一个独立亚种，因为头圆形似猫，因而被称为“国宝 中的美人”。作为和平使者，为增进国际友谊、提升陕西省的形象和美誉度发挥 了重要作用。2014 年 11 月至2015 年5 月份，陕西省林业科学院秦岭大熊猫繁 育研究中心（原陕西省珍稀野生动物抢救饲养研究中心）圈养的大熊猫突发犬瘟 热（Canine Distemper ）疫情，6 只大熊猫感染，其中5 只大熊猫临床发病，虽然 经过一系列救治，但最终全部死亡。最后1 只大熊猫犬瘟热病毒（Canine Distemper virus ，CDV ）检测阳性，经过治疗，痊愈康复。此次犬瘟热事件的发生是我国 大熊猫人工圈养种群中比较严重的一次疫情，造成了无法弥补的损失。因而，大 熊猫的疾病防控是保护圈养大熊猫种群的重要组成部分。已有大熊猫感染犬瘟热 病毒、犬细小病毒、轮状病毒并引起死亡的案例，病毒性疾病不仅严重威胁着圈 养大熊猫的健康和种群发展，而且也容易引发兽医公共卫生学问题。 本研究主要评估了四种常见病毒性疾病对陕西大熊猫人工圈养种群健康的 威胁程度，采用了国标中犬瘟热诊断技术（GB/T27532-2011 ）和犬细小病毒病诊 断技术（GB/T27533-2011 ）中的检测方法对 CDV 和犬细小病毒（Canine Parvo virus ，CPV ）两种病毒进行了检测；采用了常规PCR 方法对轮状病毒（Rotavirus ， RV ）和戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus ，HEV ）进行了检测。同时，采用了酶联 免疫法（ELISA ）测定了四种病毒抗体。 研究结果表明：在2015 年期间，检测到1 只大熊猫感染犬瘟热病毒，该大 熊猫一直未出现临床症状，经过隔离并治疗，最终康复。其他三种病毒均未检测 到。在2016 年，大熊猫四种病毒检测均为阴性。经过 CDV 疫苗免疫，大熊猫 CDV 抗体水平有明显的提高，保障了大熊猫种群的健康。此次检测为陕西圈养 大熊猫重要病毒性疾病提供流行病学资料，采取相应的预防治疗措施为大熊猫人 工圈养种群疫病防控提供了案例依据。 关键词：大熊猫；病毒检测；防治 I 目录 目 录 摘要I ABSTRACT V 第一章 文献综述1 1.1 大熊猫的进化史和习性 1 1.1.1 大熊猫的历史分布 1 1.1.2 大熊猫的特点及习性2 1.2 人工圈养大熊猫历史及现状2 1.3 大熊猫常见病毒病的危害及研究进展3 1.4 圈养大熊猫常见的病毒病 5 1.4.1 大熊猫犬瘟热 5 1.4.2 大熊猫犬细小病毒7 1.4.3 大熊猫轮状病毒 8 1.4.4 戊型肝炎病毒9 1.5 研究的内容与意义 10 第二章 圈养大熊猫常见病毒病的诊断检测 12 2.1 材料 12 2.1.1 材料样本 12 2.1.2 主要试剂 12 2.1.3 仪器和设备 12 2.2 方法 13 2.2.1 样本处理 13 2.2.2 提取RNA 13 2.2.3 提取DNA 14 2.2.4 大熊猫犬瘟热病毒检测 15 2.2.5 大熊猫犬细小病毒检测 15 2.2.6 大熊猫轮状病毒检测 16 2.2.7 大熊猫戊型肝炎病毒检测 16 2.2.8 ELISA 检测 17 2.3 结果 17 2.3.1 PCR 检测结果 17 2.3.2 CDV 快