生物制药工艺学四.pptxVIP

1;2;构成天然蛋白质的20种氨基酸;（1）根据氨基酸在pH5.5溶液中带电状况分为 酸性Aa Aa(PI2.8-3.2) 中性Aa(PI6.2-6.8) 碱性Aa Aa(PI9.7-10.7) ? （2）依R基团差异分为 脂肪族Aa 　 芳香族Aa 杂环Aa 　　　　　　　　　　　　　 ;5;6;（3） 特殊基团反应 酪氨酸的酚羟基可产生米伦反应与福林－达尼斯反应； 　　精氨酸的胍基产生坂口反应； 色氨酸的吲哚基与芳醛产生红色反应； ;8;? 1）治疗消化道疾病的氨基酸及其衍生物 谷氨酸、谷氨酰胺、乙酰谷酰胺铝、甘氨酸、组氨酸盐酸盐 ? 2）治疗肝病的氨基酸及其衍生物 精氨酸盐酸盐、鸟天氨酸、谷氨酸钠、蛋氨酸、瓜氨酸、赖氨酸、天冬氨酸 ;10;11;12;13;14;1、蛋白质水解方法（熟悉） （1）酸水解法 ;（2）碱水解法 ;（3）酶水解法 ? 特点分析 优点：反应条件温和，无需特殊设备，氨基酸不破坏，无消旋作用。 缺点：水解不彻底，产物中除氨基酸外，还较多肽类。 ;18;?（2）特殊试剂沉淀法 原理：某些有机或无机试剂与相应氨基酸形成不溶性衍生物 例： 　亮氨酸能与邻二甲苯－4-磺酸形成不溶性盐沉淀 　组胺酸与HgCL2形成不溶性汞盐沉淀 精氨酸与苯甲醛生成苯亚甲基精氨酸沉淀 利用此反应可从混合氨基酸溶液(如猪血粉水解液)中分别分离L-亮氨酸,组氨酸,精氨酸;（3）吸附法 原理：吸附剂对不同氨基酸吸附力的差异 例：颗粒活性炭对苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸的吸附力大于对其它非芳香族氨基酸的吸附力,可从氨基酸混合液中分离上述氨基酸 ?;（4）离子交换法 原理：利用离子交换剂对不同氨基酸吸附能力的差异。在特定条件下，不同氨基酸的带电性质及解离状态不同，因此同一种离子交换剂对不同氨基酸的吸附力不同，可实现氨基酸混合物的分组或单一成分分离 ;(1) 惰性不溶性载体（骨架） (2) 功能基团或活性基团（与骨架相联） (3) 平衡离子或活性离子（与功能基团所带电荷相反的可移动的离子） ;③;24;25;26;（二）用水解法生产氨基酸的品种及工艺（了解） ? ? L-亮氨酸（L-Leucine，L-leu）的制备 （1）结构与性质 来源：玉米麸质及血粉，角甲、棉籽饼和鸡毛。 外观：白色片状结晶 ;28;;30;31;图1微生物界糖代谢中间产物及氨基酸之间的转化关系;33;34;35;;（2）工艺路线;38; 一级种子培养：1000ml三角瓶中培养基装量为200ml，接种斜面AS1.998菌种，30℃培养,16h。 二级种子培养：接种量3.5％，培养8h，如此逐级放大培养得足够量菌种。 ;40;Response surface methodology (RSM);42;43;44;45;46;47;48;49;1、L-天冬氨酸及L-丙氨酸的制备 ?（1） 结构与性质 ①L－天冬氨酸（L-Aspartic acid，Asp）的结构与性质 　;51;;;（3）工艺路线;55;56;57;②细胞固定 E·coli（含天冬氨酸酶）的细胞固定 12％明胶， 1％戊二醛 ? 含L-天冬氨酸-β-脱羧酶假单胞菌的固定化 45℃ 5％角叉菜胶，戊二醛, ; ? 生物反应堆的制备 生物反应堆1：将含天冬氨酸酶的固定化E·coli装填于填充床式反应器（40×200cm ）. 生物反应堆2：将含L-天冬氨酸-β-脱羧酶固定化假单胞菌装填于耐受1.515×105Pa压力的填充床式反应器（30×180cm）;60;61;62;√2.酶拆分法制备L-苯丙氨酸（L-phenylalanine，L-phe） （1）结构与性质 ;64;65;;67;68;69;70;71;72;73;74;75;76;（2）合成路线 以浓硫酸为脱水剂，使L-谷氨酸与乙醇缩合成L-谷氨酸-γ-乙酯，后者经硼氢化钾还原即成L-Pro。 ;;79;80;81;82;83;1、蛋白质水解方法（熟悉） （1）酸水解法 ;（4）离子交换法 原理：利用离子交换剂对不同氨基酸吸附能力的差异。在特定条件下，不同氨基酸的带电性质及解离状态不同，因此同一种离子交换剂对不同氨基酸的吸附力不同，可实现氨基酸混合物的分组或单一成分分离 ;（2）工艺路线;87;√2.酶拆分法制备L-苯丙氨酸（L-phenylalanine，L-phe） （1）结构与性质 ;89;90