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鸡离体肝细胞的分离和培养 作者：杜礼琴 摘要：本试验采用不同的方法分离鸡肝细胞，并进行体外培养和观察。试验选用3日龄粤黄鸡 和21日龄坏冈黄鸡，分别采用0. 25嗚夷蛋白酶加0. 01临DTA不同时间消化、0.1滋原酶消化、0. 2% 胶原酶消化、混合酶消化、先0. 2瘢原酶消化后0. 25%夷蛋白酶加0. 01临DTA两步消化、先0. 25% 胰蛋白酶加0. 019€DTA后0. 2液原酶两步消化、肝组织剪碎培养、组织块0. 25%夷蛋白酶预消化、 组织块0.2瘢原酶预消化、3剧和1品不同大小肝组织块培养、不同产地胰蛋白酶消化、采用玻璃 瓶和塑料瓶培养等试验方法分离培养肝细胞。添加含有1%鸟胚渗出液和W彌台牛血清的［MMF-12 完全细胞培养液，于37oC、饱和湿度、5%口的培养箱中长期培养，观察肝细胞的生长增殖状况及 形态变化，定期换液并收集上清液，检测白蛋白和胆汁酸的分泌情况，以判断肝细胞的活力。结果 表明：先0. 2瘢原酶消化后0. 25%夷蛋白酶加0. 01喘DTA两步消化培养的方法，分离和培养效果最 好，肝脏在培养液中分裂增殖，生长良好，培养时间最长。其次是0.2瘢原酶消化培养法、0.25% 胰蛋白酶加0. OI^EDTA消化30nhn. 0.19餃原酶消化培养法、组织块0. 25%夷蛋白酶预消化培养法。 塑料培养瓶比玻璃质地培养瓶的更利于鸡肝细胞贴壁和生长。 关键词：