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探讨紫外可见分光光度法的应用 孙莹 摘 要：本文介绍了近年来紫外可见分光光度法发展历程及仪器更新情况，着重探讨了紫外可见分光光度法与其他技术联合应用后达到提高检测灵敏度、降低检出限目的，从而实现多组分体系样品不经分离直接测定。 关键词：紫外可见分光光度法;联合应用;新方法 紫外可见分光光度法（UV-Vis）是药品检验检测中用于鉴别、杂质检查和定量测定的实验方法，利用样品分子对190～760nm波长的电磁波产生吸收程度不同的特性，达到定性、定量、分析结构的实验目的。由于紫外可见分光光度法具有广泛适用、操作简单、结果可靠的明显优势，推动各领域相关检验检测迅速发展。 1 仪器的发展 1.1光源 紫外可见分光光度计常规光源有氘灯和卤钨灯，其中190～380nm波长处的紫外光源由氘灯提供，380～780nm波长处的可见光由卤钨灯提供，二者经常结合使用。另外，已有全波长光源氙灯，能提供280～980nm波长的紫外、可见和近红外光源。鉴于LED（发光二极管）行业的不断发展和在各行业的普遍应用，新型紫外可见分光光度计应用LED作为光源已成为研究探讨热点。 1.2光栅 光栅是分光系统中核心元件，运用了光的衍射与干涉作用，分为透射式光栅和反射式光栅（闪耀光栅），具体包括平面光栅、凹面光栅、平面全息光栅、阶梯光栅等[1]。随着技术的不断更新，反射式光栅因能提高光能量的利用率，而被广泛应用;平面全息光栅因具有杂散光小、无伪线等明显优势，而迅速发展;凹面光栅具有结构简单、工作稳定特点，借助全息技术的发展应运而生。 1.3探测器 常规紫外可见分光光度计是扫描光栅型分光光度计，探测器由光电管、光电二极管和光电倍增管组成。近年来，随着阵列型光电器件技术发展，应用阵列型光电探测器的固定光栅型分光光度计面世，这种探测器能够显著提高测量速度，甚至以毫秒量级，并且能够累计光照从而探测微弱信号。同时，固定光栅型分光光度计具有便携特点，工作人员可以带入现场进行实时检测。 1.4发展趋势 紫外可见分光光度计趋于无机械活动部件、集成化、固态化，才能完成情况复杂、高温高压的检测现场，同时，要兼具检测速度快、数据可靠、重现性高等特点。其中，紫外可见分光光度计微型化和固态化主要体现在色散系统中，而整体结构的微型化主要体现在输入输出系统微型化、光源的微型化、探头与仪器采用光纤连接中。输入输出系统使用了触摸屏，避免因输入输出系统分立而产生的体积大问题;光源采用了光纤光源，从而实现微型化;探头选择放置在仪器外部，与仪器采用光纤连接，从而实现远距离测量。 从分光光度计的发展来看，运用固态式设计的阵列式探测器才能让分光光度计成为广泛适应各领域的测量分析设备。技术上，运用光纤技术能够使分光光度计配置灵活、使用便携;设计上，模块化结合光纤能够使分光光度计自由构建;发展理念上，计算机技术能够使分光光度计自动化、智能化。 2 紫外可见分光光度法与其他技术联用 2.1與浊点萃取技术联用 浊点萃取技术是一种新出现的液-液萃取法，依据表面活性剂胶束的溶解和浊点特性，通过改变参数（如溶液温度、pH值、离子浓度）而引发疏水相与亲水相分离后富集。紫外可见分光光度法与浊点萃取技术联合使用，能发挥浊点萃取技富集特点，富集待测元素从而排除干扰元素影响。在测定维生素B12中钴含量的实验中，紫外可见分光光度法与浊点萃取技术联用后能降低检出限（0.4998μg/L）[2]。 2.2与流动注射分析技术联用 流动注射分析技术因具有普适性、试剂耗材少、结果准确度高等优点被众多领域广泛应用。紫外可见分光光度法与流动注射分析技术联合使用，再与离子交换、多流切换、停流技术等分离转化技术配合，通过测定样品紫外吸收值来确定样品含量，具有分析灵敏、选择性强等特点[3]。将具有光电二极管阵列检测器的分光光度计与流动注射分析技术联用后更是显现了快速扫描的优势，利用专用软件可实现连续自动测定多组分体系，拓展了流动注射分析技术的应用领域和应用范围。 2.3与毛细管电泳法联用 毛细管电泳法是一种液相分离法，基于在高压电场中，各组分淌度存在的差异，利用毛细管作为分离通道从而实现液相分离。紫外可见分光光度法与毛细管电泳法联合使用能发挥毛细管电泳法高效、微量、经济、环境污染少等显著优势。 2.4与高效液相色谱法联用 紫外吸收检测器是高效液相色谱法中应用最广泛的检测器，具有灵敏度高、选择性好的显著特点，而且紫外吸收检测器对溶剂变化敏感度低，对强吸收物质的检出限低。 3 新型的分光光度法 3.1固相分光光度法 以树脂相吸光光度法、泡沫塑料相吸光光度法为代