T CVMA 42-2020 猫疱疹病毒荧光定量PCR检测方法.pdf

ICS 11.220 B 41 团 体 标 准 T/CVMA 42-2020 猫疱疹病毒荧光定量PCR 检测方法 Detection of feline herpes virus by fluorescent quantitative PCR 2020-12-22 发布 2020-12-22 实施 中 国 兽 医 协 会 发 布 T/CVMA 42-2020 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由青岛农业大学提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位：青岛农业大学、中国动物卫生与流行病学中心、中国兽医药品监察所、上海基灵 生物科技有限公司、莱阳市农业农村局。 本文件主要起草人：单虎、倪彬砚、王媛媛、印春生、朱旭、孙建华、于静静。 I T/CVMA 42-2020 猫疱疹病毒荧光定量PCR 检测方法 1 范围 本文件规定了猫疱疹病毒（FHV ）荧光定量PCR检测方法的材料、耗材与器械、试剂、引物、操作 步骤和结果判定等方法。 本文件适用于猫的疱疹病毒的实验室检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件 荧光定量PCR ：荧光定量聚合酶链反应（fluorescent quantitative polymerase chain reaction ） PCR ：聚合酶链反应（polymerase chain reaction ） DNA ：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid ） PBS ：磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution ） FAM ：羧基荧光素（carboxyfluorescein ） BHQ1 ：无荧光淬灭基团（black hole quencher-1） FHV ：猫疱疹病毒（feline herpesvirus ） Ct值：每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数（cycle threshold ） 5 试剂和材料 5.1 试剂 5.1.1 总则：除非另有说明，所用试剂均为分析纯，试验用水符合GB/T 6682的要求。 5.1.2 DNA 提取试剂盒。 5.1.3 一步法荧光定量PCR 试剂盒(探针法) 。 1 T/CVMA 42-2020 5.1.4 灭菌去离子水, 除有特殊说明外，所有检测用试剂均为分析纯，检测用水应符合GB/T 668