人教版选修1血红蛋白的提取和分离第1课时教案.ppt

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的 主要组成成分，负责血液中 O 2 和 CO 2 的 运输。在本课题中，我们将以血红蛋白 为实验材抖，学习蛋白质提取和分离的 一些基本才技术。 一、基础知识 （一）凝胶色谱法（分配色谱法） 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 凝胶是一些 微小 的 多孔 球体，由 多糖类化合物 聚糖、琼脂糖等）构成。 凝胶粒 （如葡 分子量 直径大小 大 大于凝胶颗粒空 隙直径，被阻挡 在颗粒的外面 垂直向下移动 较快 较短 先从凝胶柱洗脱 出来 小 小于凝胶颗粒空 隙直径，可以进 入颗粒内部 垂直向下移动， 无规则扩散进入 颗粒内部 较慢 较长 后从凝胶柱洗脱 出来 运动方式 运动速度 运动路径 洗脱次序 （二）缓冲溶液 1. 概念： 在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或 稍加稀释 不引起 溶液 pH 发生 明显变化 的作用叫做缓冲作 用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 2. 作用： 能够抵制外界的酸或碱的对溶液的 pH 值的影响， 维持 pH 基本不变。 3. 缓冲溶液的配制： 通常由 1 ～ 2 种缓冲剂 溶解于水中配 制而成。调节缓冲剂的 使用比例 就可以制得在不同 pH 范围内使用的缓冲液。 基础知识 （二）缓冲溶液 4. 缓冲溶液的组分分类 ①弱酸和弱酸盐组合 H 2 CO 3 /NaHCO 3 CH 3 COOH/CH 3 COONa ②弱碱和弱碱盐 NH 4 OH /NH 4 CI ③多元弱酸的酸式盐和其他所对应的次级盐 NaH 2 PO 4 /Na 2 HPO 4 KH 2 PO 4 /K 2 HPO 4 （三）电泳 1. 概念： 带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。 2. 原理： ①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有 可解离 的基团 ，在一定的 pH 下，这些基团会 带上正电或负电 。 ②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其 所带电荷相 反 的电极移动。 ③电泳利用了待分离样品中各种分子 带电性质的差异 以及 分子本身的大小，形状的不同 使带电分子产生 不同的迁移 速度 ，从而实现样品中各种分子的分离。 3. 电泳的类型： 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 电泳原理示意图 阳 极 （ ） 阴 极 （ ） — + 带正电的离子 带负电的离子