金银花中绿原酸的提取.docx

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金银花中绿原酸的提取、分离纯化 绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸,异名咖啡鞣酸,是植物在有氧呼吸 过程中经莽草酸途径代谢产生的苯丙素类化合物。化学结构为: 绿原酸 由结构可以看出它是含有羧基和邻二酚羟基的极性有机酸化合物,为酸性。 由于分子内含有邻二酚羟基,受热、见光易氧化,因此供试液要在阴凉、避光下 保存备用,且高温和长时间加热不利于绿原酸的提取。在碱性条件下,绿原酸易 发生水解,植物体内存在的绿原酸往往是混合物而非单一组分。 绿原酸物理性质: 名称 分子式 分子量 性状 熔点 溶解度 绿原酸 C16H18O9 345.30 半水化合物为 针状晶(110C 变为无水化合 物) 208 r 水中4%,在热水中溶解度更 大,易溶于乙醇、丙酮和甲醇 等极性溶剂,难溶于氯仿、苯、 乙醚等亲脂性有机溶剂 、实验目的: 1、 了解金银花中有关成分,掌握绿原酸的相关性质,设计提取方案 2、 掌握pH梯度萃取法分离所需成分 3、 掌握聚酰胺柱层析的方法 二、实验试剂、仪器 试剂:金银花,乙醇(70% 10%),盐酸(6mol/L),乙酸乙酯,NaOH( 5%), 乙酸,聚酰胺,硅胶 仪器:冷凝回流装置,抽滤装置,旋蒸仪,分液漏斗,层析柱 三、绿源酸的提取、分离和纯化 (1)提取: 称取金银花50g加入1000mL的圆底烧瓶中,加入 500mL( 10倍量)70%的 乙醇,75C冷凝回流3h,倒出液体,再用400mL(8倍量)、400mL (8倍量)回 流两次,每次2h,过滤,合并滤液,然后80°C下浓缩滤液或者是用旋蒸仪旋干滤 液至无醇味。 (2)分离纯化: 取金银花提取浓缩液,以浓度 6mol/L的HCI溶液调pH值至3.0左右,以3 倍量的乙酸乙酯分3次萃取,合并萃取液(乙酸乙酯层),以5%的NaOH溶液调 萃取液pH至8.0左右,分取水层减压浓缩。 取金银花浓缩液,用聚酰胺拌样,用聚酰胺(80-100目)装柱(用量大概为 绿原酸粗品的5倍),装入柱径与柱长比为1: 7的层析柱中,常压下用10%的乙 醇作为洗脱剂洗脱,收集流分,点样与标准品对照(标准品用 50%的甲醇溶解, 0.2mg/mL),合并相同流分,旋干即为所要提取的绿原酸。展开剂为乙酸乙酯: 乙酸:水=2:1:1 (硅胶色谱)。 (将相同流分合并后用乙酸乙酯重结晶能提高纯度 )

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