金银花中绿原酸的提取.docx

金银花中绿原酸的提取、分离纯化 绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸组成的缩酚酸，异名咖啡鞣酸，是植物在有氧呼吸 过程中经莽草酸途径代谢产生的苯丙素类化合物。化学结构为： 绿原酸 由结构可以看出它是含有羧基和邻二酚羟基的极性有机酸化合物，为酸性。 由于分子内含有邻二酚羟基，受热、见光易氧化，因此供试液要在阴凉、避光下 保存备用，且高温和长时间加热不利于绿原酸的提取。在碱性条件下，绿原酸易 发生水解，植物体内存在的绿原酸往往是混合物而非单一组分。 绿原酸物理性质： 名称 分子式 分子量 性状 熔点 溶解度 绿原酸 C16H18O9 345.30 半水化合物为 针状晶（110C 变为无水化合 物） 208 r 水中4%,在热水中溶解度更 大，易溶于乙醇、丙酮和甲醇 等极性溶剂，难溶于氯仿、苯、 乙醚等亲脂性有机溶剂 、实验目的： 1、 了解金银花中有关成分，掌握绿原酸的相关性质，设计提取方案 2、 掌握pH梯度萃取法分离所需成分 3、 掌握聚酰胺柱层析的方法 二、实验试剂、仪器 试剂：金银花，乙醇（70% 10%）,盐酸（6mol/L）,乙酸乙酯，NaOH（ 5%）， 乙酸，聚酰胺，硅胶 仪器：冷凝回流装置，抽滤装置，旋蒸仪，分液漏斗，层析柱 三、绿源酸的提取、分离和纯化 （1）提取： 称取金银花50g加入1000mL的圆底烧瓶中，加入 500mL（ 10倍量）70%的 乙醇，75C冷凝回流3h,倒出液体，再用400mL（8倍量）、400mL （8倍量）回 流两次，每次2h,过滤，合并滤液，然后80°C下浓缩滤液或者是用旋蒸仪旋干滤 液至无醇味。 （2）分离纯化： 取金银花提取浓缩液，以浓度 6mol/L的HCI溶液调pH值至3.0左右，以3 倍量的乙酸乙酯分3次萃取，合并萃取液（乙酸乙酯层），以5%的NaOH溶液调 萃取液pH至8.0左右，分取水层减压浓缩。 取金银花浓缩液，用聚酰胺拌样，用聚酰胺（80-100目）装柱（用量大概为 绿原酸粗品的5倍），装入柱径与柱长比为1: 7的层析柱中，常压下用10%的乙 醇作为洗脱剂洗脱，收集流分，点样与标准品对照（标准品用 50%的甲醇溶解， 0.2mg/mL）,合并相同流分，旋干即为所要提取的绿原酸。展开剂为乙酸乙酯： 乙酸：水=2:1:1 （硅胶色谱）。 （将相同流分合并后用乙酸乙酯重结晶能提高纯度 ）